ОЧИСТКА РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ ResD-ResE Bacillus cereus, ЭКСПРЕССИРОВАННЫХ В ШТАММАХ Escherichia coli

Аннотация:

Сконструированы рекомбинантные штаммы Е. coli, экспрессирующие гены resD и resE Bacillus cereus АТСС 14579т, слитые с геном убиквитина, проведена очистка белков ResD и ResE, кодируемых этими генами. Использованный подход позволил впервые получить электрофоретически гомогенные препараты этих белков, минуя стадии очистки в денатурирующих условиях. Простота разработанного метода позволила использовать его для выделения и последующего скрининга мутантных вариантов ResD и ResE с высокой производительностью. Выход рекомбинантных белков составил 150 мг/г сырой массы клеток. Бактерии различных штаммов вида Bacillus cereus продуцируют большое количество потенциальных факторов патогенности: гемолизины, фосфолипазы, эметические токсины, энтеротоксины, металлопротеазы и коллагеназы. Показано, что синтез ряда энтеротоксинов у В.cereus, таких как Nhe (негемолитический энтеротоксин), Нbl (двухкомпонентный гемолизин BL), а также синтез глобального регулятора PlcR зависит от чувствительной к окислительно-восстановительному потенциалу среды двухкомпонентной системы (ДС) сигнальной трансдукции ResDE, отвечающей за регуляцию генов микроаэробного и анаэробного метаболизма у бактерий рода Bacillus.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2013
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2013.-N 6.-С.547-553. Библ. 25 назв.
Просмотров: 40