ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ ЧЕТВЕРТИЧНОЙ СТРУКТУРЫ G17 АСА -АЦИЛA3Ы БАКТЕРИИ Brevundimonas diminuta, ПОЛУЧЕНИЕ БОЛЕЕ СТАБИЛЬНЫХ АНАЛОГОВ ФЕРМЕНТА

Аннотация:

Исследованы физико-химические и энзиматические характеристики гибридных аналогов С17АСА-ацилазы бактерии Brevundimonas diminuta (BrdGLA), содержащих N-концевой хитинсвязывающий домен бактериальной хитиназы (BrdGlA/NmChBD), либо С-концевую олигогистидиновую последовательность (BrdGlA/H). Повышенная термостабильность BrdGIA/NmChBD может указывать на стабилизирующее влияние хитинсвязывающего домена. Исследование профилей зависимости энзиматической активности рекомбинантных аналогов BrdGIA от рН не выявило значительных различий: каталитическая активность обоих вариантов мало менялась в интервале рН 6.0—9.0 и резко снижалась при более низких значениях рН. Оба аналога обладали и сходным характером чувствительности к действию денатурирующих агентов, подвергаясь полной инактивации в присутствии 2.0 М гуанидин-хлорида. Разработана система получения изолированных рекомбинатных а- и бета-субъединиц BrdGLA. В опытах in vitro по реконструкции фермента показано, что присутствие а-субъединицы необходимо для формирования правильной пространственной структуры бета-субъединицы и образования функционально-активного фермента.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2013
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2013.-N 6.-С.554-560. Библ. 24 назв.
Просмотров: 35