ПОЛУЧЕНИЕ ХИМЕРНЫХ БЛАСТОЦИСТ МЫШИ МЕТОДАМИ ЛАЗЕРНОЙ НАНОХИРУРГИИ

Аннотация:

Описано получение химерных бластоцист мыши методами лазерной нанохирургии без использования какой-либо другой дополнительной техники. Для проведения экспериментов был разработан и сконструирован специальный лазерный микроманипулятор. В экспериментах использовали эмбриональные стволовые клетки (ЭСК) мыши, трансформированные вектором pEF-GFP, кодирующим флуоресцирующий зеленый белок. ЭСК с помощью лазерного микроманипулятора вводили в перивителлиновое пространство мышиных эмбрионов на стадии 8-и клеток. Оперированные эмбрионы культивировали in vitro на стадии вылупления из zona pellucida. Наличие флуоресценции и ее точную локализацию регистрировали на конфокальном микроскопе. Впервые было продемонстрировано, что включения введенных лазерным микроманипулятором ЭСК, обнаруживаются как во внутренней клеточной массе (ВКМ), так и в трофэктодерме химерной бластоцисты. Технология проведения нанохирургических операций на ранних доимплантационных эмбрионах млекопитающих с помощью лазерной техники открывает большие возможности не только для решения фундаментальных задач экспериментальной эмбриологии млекопитающих, но эта технология также может быть использована как перспективный метод получения химерных и трансгенных животных с заданным экспериментаторами генотипом.

Авторы:

Издание: Онтогенез
Год издания: 2013
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2013.-N 6.-С.403-408. Библ. 12 назв.
Просмотров: 57