Микробные модели для поиска ингибиторов биосинтеза стеролов

Аннотация:

На основе ранее разработанных микробных моделей предлагается высокоэффективная схема поиска ингибиторов биосинтеза стеролов (ИБС). Она основана на использовании галофильной бактериальной культуры Ilalobacterium salinarum (по прежней классификации Ilalobacterium halobium), обладающей мевалонатным путём биосинтеза стеролов, и модели грибной культуры Acremonium fusidioides (по прежней классификации Fusidium coccineum), образующей фузвдиевую кислоту (фузвдин) — антибиотик стероидной структуры, биосинтез которого в организме гриба-продуцента имеет значительное сходство с биосинтезом холестерина в организме человека. В модели H.salinarum ИБС выявляются как соединения, подавляющие рост тест-культуры, а в модели A.fusidioides — как соединения, резко снижающие продукцию фузцдина при отсутствии заметного влияния на рост продуцента. Внесение мевалоновой кислоты — одного из ключевых интермедиатов биосинтеза стеролов, снимает ингибирующее действие многих микробных метаболитов и, таким образом, служит доказательством их влияния на ранние этапы биосинтеза стеролов, включая этап работы ГМГ-КоА редуктазы. Оба теста разработаны в виде микрометодов, легко поддаются механизации благодаря миниатюризации микробиологических процессов, выращиванию культур в стерильных 96-луночных планшетах и использованию автоматических микропипеток. Сравнивается результативность обоих тестов, их чувствительность, трудоёмкость, а также способность давать ложноположитель-ные и .южноотрицательные результаты в поиске ИБС. Предложенная схема поиска ИБС, включает в себя использование обеих микробных моделей на ранних этапах поисковых работ и культуры клеток Hep G2 на поздних этапах, а также обязательный отбор на начальном этапе микробных метаболитов, обладающих противогрибковой активностью. Рассматриваются вопросы миниатюризации и механизации микробиологических работ, а также способы очистки культуральной жидкости продуцентов путём микро- и ультрафильтрации.

Авторы:

Издание: Антибиотики и химиотерапия
Год издания: 2013
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2013.-N 7.-С.3-11. Библ. 43 назв.
Просмотров: 31