ИДЕНТИФИКАЦИЯ НОВОГО ГЕНА ClFATBl, КОДИРУЮЩЕГО АЦИЛ-АСР ТИОЭСТЕРАЗУ ИЗ Cinnamomum longepaniculatum

Аннотация:

Полноразмерная последовательность, названная CIFATB1 и предположительно кодирующая тиоэстеразу, расщепляющую тиоэфирную связь между ацилом и ацилпереносящим белком (ацил-ACP), была получена из библиотеки кДНК семян Cinnamomum longepaniculatum методом SMART-RACE. Новый ген кодировал белок размером 382 аминокислотных остатка, гомологичный тиоэстеразам жирных кислот типа В (FATB) из различных растений и содержащий два важных для каталитической эстеразной активности остатка (His285 и Cys320). Транскрипция этого гена происходила во всех органах С. longepaniculatum, но преимущественно наблюдалась в семенах. Рекомбинантный белок CLFATB1, экспрессированный в клетках Escherichia соИ, гидролизовал тиоэфирные связи между насыщенными С16:0 и С18:0 жирными кислотами и АСР с большей активностью, чем между ненасыщенной С18:1 жирной кислотой и АСР. При избыточной экспрессии белка C1FATB1 в трансгенной форме табака наблюдалось повышение гидролитической тиоэстеразной активности неочищенных белковых экстрактов из листьев по отношению к С16:0-АСР и С18:0АСР на 20 и 5,7% соответственно. Одновременно возрастало количество пальмитиновой и стеариновой кислот в листьях на 15,4 и 10,5% соответственно относительно нормы. Однако гетерологическая экспрессия этого рекомбинантного белка в трансгенной форме табака снижала тиоэстеразную активность неочищенных белковых экстрактов по отношению к С18:1-АСР на 12,7% в сравнении с нормой, а также уменьшала содержание ненасыщенных олеиновой, линолевой и линоленовой кислот в листьях этих растений. Таким образом, C1FATB1 мог бы выступить в качестве положительного регулятора накопления насыщенных и отрицательного регулятора продукции ненасыщенных жирных кислот, воздействуя на путь их синтеза в растениях.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2013
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2013.-N 12.-С.1730-1737. Библ. 20 назв.
Просмотров: 42