НИКОТИНАМИДАЗА ИЗ ТЕРМОФИЛЬНОЙ АРХЕИ Acidilobus saccharovorans: СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

Аннотация:

Никотинамидаза — фермент, участвующий в поддержании гомеостаза и рециркуляторном биосинтезе НАД+ у большинства прокариот, что делает его потенциальной мишенью лекарственной терапии. В геноме термофильной археи Acidilobus saccharovorans выявлен ген (ASAC_0847), кодирующий гипотетическую никотин-амидазоподобную гидролазу. Продукт экспрессии данного гена в Escherichia coli, NA_AS0847, являющийся гомодимером с молекулярной массой 46,4 кДа, выделен и охарактеризован как Fе2+-содержащая никотинамидаза (kcat/Кm = 427 мМ-1 • с-1)/пиразинамидаза (kcat/Кm = 331 мМ-1 • с-1). Фермент характеризуется высокой термофильностью (Топт = 90°, Еа = 30,2 ± 1,0 кДж/моль) и термостабильностью (Т1/2(60°) = 180 мин, Т1/2(80°) = 35 мин), активен в широком диапазоне рН с оптимумом при рН 7,5. Отличительной особенностью NA_AS0847 является присутствие в активном центре ионов Fe2+ вместо Zn2+, а также ингибирование активности микромолярными концентрациями Zn2+. Проведенный анализ аминокислотных последовательностей гомологичных никотинамидаз архей позволил выявить новую консервативную последовательность металлсвязывающего мотива DXHXXXDXXEXXXWXXH.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2014
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2014.-N 1.-С.68-77. Библ. 26 назв.
Просмотров: 78