ИССЛЕДОВАНИЕ ПОВЕРХНОСТНЫХ АНТИГЕННЫХ ЭПИТОПОВ Yersinia pseudotuberculosis С ПОМОЩЬЮ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ

Аннотация:

С помощью набора моноклональных антител проведена оценка влияния внешних воздействий на иммунохимическую активность бактерий Yersinia pseudotuberculosis и выделенных из них препаратов липополисахарида. Показано, что полученные гибридомы продуцируют моноклональные антитела к различным и, по-видимому, видоспецифическим эпитопам, ассоциированным с О-боковыми цепями липополисахарида, концентрация которых возрастала с понижением температуры культивирования бактерий. Установлено ингибирующее влияние протеиназы К, пепсина и трипсина на иммунохимическую активность бактериальных клеток, определенную методом твердофазного имму-ноферментного анализа. Иммуноферментным методом показано, что на результаты реакции между использованными моноклональными антителами и антигенными препаратами (липополисахари-дами и микробными клетками) разнонаправленно влияет обработка перйодатом натрия, что может быть следствием различной локализации эпитопов липополисахарида, выявляемых моноклональными антителами четырех линий. Липополисахарид (ЛПС) — основной компонент наружного слоя внешней мембраны грамот-рицательных бактерий, определяющий их важнейшие иммунофизиологические свойства. ЛПС является мощным фактором патогенности иерси-ний, обусловливая токсичность, патологические изменения в сосудах микроциркуляторного русла, колонизирующую способность, устойчивость бактерий к антимикробным пептидам, сывороточному комплементу, антибиотикам и др. Несомненна значимость Л ПС в развитии иммунных реакций, однако такого рода данные носят противоречивый характер. С одной стороны, ЛПС способен стимулировать врожденную и специфическую невосприимчивость макроорганизма по отношению к патогену , с другой — может подавлять развитие иммуногенеза . Такой широкий спектр иммунобиологических эффектов ЛПС объясняется, по-видимому, таксономическими различиями, серовариабельно-стью используемых микроорганизмов, разнообразием методов выращивания культур штамма-продуцента, выделения и очистки, иных условий осуществления экспериментов, в том числе особенностями иммунофизиологического статуса макроорганизма. Показано, в частности, что от температуры культивирования иерсиний зависят степень ацилирования липида А, полимеризации О-боковых цепей, размеры и состав кора ЛПС. Термоиндуцибельные различия в химической и, как следствие, пространственной структуре поверхностных антигенов определяют разнообразие биологических свойств возбудителя в условиях in vitro и при взаимодействии с восприимчивым макроорганизмом (токсичность, адге-зивность, инвазивность, вирулентность, устойчивость к комплементу, антимикробным пептидам и др.) . Зависимость упомянутых свойств возбудителя от условий культивирования характерна для многих энтеробактерий, в том числе и для возбудителя псевдотуберкулеза. Вместе с тем антигенная структура поверхностных компонентов псевдотуберкулезного микроба, связь между структурой ЛПС, его анти-генностью и иммунофизиологической значимостью исследованы в меньшей степени. Под термином "антигенность" здесь понимается способность биообъекта индуцировать образование комплементарных антител и (или) специфически взаимодействовать с ними. Такая работа предполагает применение не только поликлональных, но и моноклональных антител (МКАт) к различным эпитопам изучаемых антигенов.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2014
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2014.-N 2.-С.203-210. Библ. 27 назв.
Просмотров: 64