СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНО АКТИВНЫХ ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫХ МЫШЕЧНЫХ КЛЕТОК

Аннотация:

Для успешного изучения патогенеза мышечных заболеваний требуются информативные клеточные модели. В настоящее время не существует универсальной культуры мышечных клеток, которая могла бы являться единым стандартом для исследования патофизиологии мышечных и нейромышечных заболеваний. Многие клеточные линии не обладают достаточной степенью дифференцировки, функционально незрелые и не всегда могут подвергаться генетическим модификациям. Целью данной работы был выбор доступной и информативной клеточной модели дифференцированных мышечных клеток, которая была бы пригодна для комплексного изучения функциональных свойств миоцитов и патогенеза мышечных заболеваний in vitro. Анализировали мультипотентные мезенхимные стволовые клетки человека, терминально дифференцированные миофибриллы мыши и первичные сателлитные клетки мыши. Показано, что лишь небольшая часть мезенхимных стволовых клеток и только при сокультивировании с клетками линии С2С12 способна к дифференцировке в мышечном направлении. В первичных миофибриллах мыши лентивирусная трансдукция оказывалась токсичной, и трансдуцированные клетки были не способны реагировать на стимуляцию, т. е. были физиологически неактивны. Сателлитные клетки наиболее эффективно подвергались лентивирусной трансдукции и были способны в условиях дифференцировки формировать миотрубки. Функциональный анализ полученных миотрубок показал их способность отвечать сокращением на электрическую и химическую стимуляции. Наличие кальциевых и натриевых каналов в мембране миотрубок было подтверждено методом пэтч-кламп. Таким образом, наиболее перспективными для дальнейшего применения оказались сателлитные клетки, которые в дифференцированном состоянии по морфологическим и функциональным признакам наиболее схожи со зрелыми мышечными клетками, миофибриллами и, кроме того, могут подвергаться генетическим модификациям.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2014
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2014.-N 4.-С.291-299. Библ. 36 назв.
Просмотров: 21