МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ СУБЪЕДИНИЦ ПРОТЕАСОМ, ОБЛАДАЮЩИХ ЭНДОРИБОНУКЛЕАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Аннотация:

Протеасомы выступают в качестве основного нелизосомального аппарата внутриклеточного протеолиза и принимают участие в регуляции большинства важнейших клеточных процессов. Несмотря на значительный прогресс в понимании функционирования протеасом, некоторые вопросы, в частности РНКазная активность этих рибонуклеопротеиновых комплексов и ее регуляция, остаются малоисследованными. В настоящей работе обнаружено, что ряд белков, соответствующих по электрофоретической подвижности субъединицам 20S корового комплекса протеасом, обладает эндорибонуклеазной активностью по отношению к смысловой и антисмысловой последовательностям З'-НТР мРНК с-тус. Масс-спектрометрический анализ триптических гидролизатов данных белков показал присутствие в пробах субъединиц 20S протеасомы — al (PSMA6), a5 (PSMA5), a6 (PSMA1) и а 7 (PSMA3). Выявлены ряд новых сайтов фосфорилирования субъединиц al (PSMA6) и a 7 (PSMA3), а также существование формы субъединицы a5 (PSMA5) с делецией 20 N-концевых аминокислотных остатков. Наблюдаемые различия в проявлении индивидуальными субъединицами эндонуклеазной активности, по-видимому, объясняются посттрансляционными модификациями данных белков, в частности фосфорилированием. Показано, что специфичность РНКазной активности изменяется при дефосфорилировании протеасом, а также под влиянием катионов Са и Mg. Сделаны выводы о влиянии статуса ПТМ субъединиц протеасом на специфичность их РНКазной активности.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2014
Объем: 16с.
Дополнительная информация: 2014.-N 4.-С.300-315. Библ. 45 назв.
Просмотров: 25