Мониторинг в процессе культивирования средневзвешенного размера клеток по их гидродинамической ориентации

Аннотация:

Метод циклического измерения средневзвешенного размера клеток в режиме on-line был впервые использован для мониторинга культивирования бактерий Lactobacillus plantarum. В основе метода лежат измерения процесса дезориентации клеток в цилиндрическом потоке Tailor-Couette после его остановки. В качестве референсного использован метод анализа микрофотографий, полученных на разных этапах культивирования. На основе полученных данных об изменении размеров клеток при анаэробном периодическом культивировании лактобацилл показана возможность применения предлагаемого метода для описания процесса культивирования, его валидации и оптимизации. Ключевые слова: гидродинамическая ориентация клеток, мониторинг средневзвешенного размера клеток. Определение размеров клеток в микробиологии и биотехнологии является одной из наиболее распространенных измерительных процедур и может осуществляться множеством методов. Размер используется при классификации клеток, при валидации процессов культивирования, при расчете абсолютного титра клеток по результатам измерения оптической плотности (ОП) суспензии и в множестве других приложений. Новым направлением является оценка процессов внутриклеточного метаболизма и идентификации во времени точек смены процессов метаболизма или метаболических ключей по кинетике изменения размеров клеток. При мониторинге процессов культивирования методика измерения размеров должна удовлетворять одновременно нескольким критериям: процедура должна быть полностью автоматизированной и проводиться в режиме on-line; измерение размеров должно выполняться с высокой точностью; желательно отсутствие процедуры пробопод-готовки; технические средства для выполнения измерений должны быть достаточно дешевыми, а стоимость одиночного измерения незначительна. К сожалению, мониторинг морфометричес-ких параметров клеток не получил должного распространения именно из-за невозможности соблюдения всего указанного множества ограничений. У проточных анализаторов размера частиц чрезмерно высокая стоимость анализа; методика их использования предполагает проведение большого числа ручных процедур. У анализаторов микрофотографий существует ограничение по точности при измерении мелких клеток, а сама процедура требует пробоподготовки. Список возможных методов и их ограничений не исчерпывается отмеченными вариантами и может быть значительно расширен.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2014
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2014.-N 2.-С.74-79. Библ. 6 назв.
Просмотров: 44