ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА СТИМУЛЯЦИИ ЛИМФОЦИТОВ ФИТОГЕМАГГЛЮТИНИНОМ РЕАКЦИИ БЛАСТТРАНСФОРМАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ С МОНОКЛОНАЛЬНЫМИ АНТИТЕЛАМИ KI-67

Аннотация:

Предложен новый (иммуноцитохимический) способ оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) человека при их стимуляции фитогемагглютинином (ФГА) вместо общепринятого радиометрического метода с использованием в качестве метки 3Н-тимидина. Peaкцию оценивали с помощью люминесцентного микроскопа при непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве маркера пролиферирующих клеток ядерного антигена Ki-67, выявляемого с помощью моноклональных антител (МКА) Ki-67. О функциональной способности лимфоцитов судили по количеству визуализированных (светящихся) Ki-67-положительных клеток, появляющихся после 3-суточной ФГА-стимуляции их пролиферации. Проведено сравнение иммуноцитохимического (с маркером Ki-67) и радиометрического (с меткой 3Н-тимидином) методов ФГА-стимуляции лимфоцитов. Обосновано преимущество иммуноцитохимического метода оценки РБТЛ перед радиометрическим относительно возможности его более широкого внедрения в лабораторную практику. Исследование функционального состояния лимфоцитов, определяемого по пролиферативному ответу на митогены или антигены, является одним из наиболее информативных методов оценки показателей клеточного иммунитета. Среди митогенов наибольшее распространение получил фитогемагглютинин (ФГА) после того как в 60-х годах прошлого столетия было обнаружено, что под его влиянием большая часть лимфоцитов через 72 ч в результате пролиферации трансформируется в бласты. В связи с этим реакцию назвали реакцией бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ). Первоначально оценку реакции проводили на световом микроскопе с подсчетом морфологически различимых бластов. Однако из-за субъективности оценки метода морфологическая окраска была вскоре заменена на использование в конце реакции (после 3-суточного культивирования лимфоцитов с ФГА) радиоактивной метки 3Н-тимидина, включающегося в бласттрансформированные лимфоциты, с подсчетом радиоактивности на автоматическом сцинтилляционном бета-счетчике.

Авторы:

Издание: Клиническая лабораторная диагностика
Год издания: 2014
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2014.-N 7.-С.51-54. Библ. 25 назв.
Просмотров: 479