Водно-фенольная экстракция: новое применение для очистки интерферона-бета

Аннотация:

Проведено сравнение мицеллярной и водно-фенольной экстракции с целью очистки рекомбинантного IFNбета-1b от эндотоксинов и белков клетки-хозяина. Показано, что эффективное удаление всех примесей происходило только с применением фенола. Подобраны условия для образования трех фаз: водной с липолполисахаридами, фенольной с интерфероном и нерастворимой, содержащей белки Е. coli. Полное освобождение IFNбета-1b от белков клетки-хозяина легко достигалось путем последующей его очистки на ОФ ВЭЖХ-сорбенте. Использование методов генетической инженерии дало возможность экспрессировать гены интерферонов в бактериях, дрожжах и клетках млекопитающих, что в свою очередь привело к созданию ряда медицинских препаратов. В частности, создано ЛC на основе рекомбинантного IFNP-lb, которое применяют для лечения такого заболевания, как рассеянный склероз. В настоящее время в клинической практике используют два интерферона: бета-1а и бета-1b. IFNбета-1a является гликозилированным белком с молекулярной массой 20 кДа. Его первичную структуру составляют 165 аминокислотных остатков, три из которых являются цистеинами, но только два из них образуют внутримолекулярную дисульфидную связь в положении Cys31-Суs 141, а один цистеин в положении 17 имеет свободную сульфгидрильную группу, из-за чего белок склонен к образованию агрегатов. Такой интерферон либо выделяют из природных источников, либо синтезируют в клетках млекопитающих.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2014
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2014.-N 3.-С.24-33. Библ. 34 назв.
Просмотров: 91