АНАЛИЗ АКТИВНОСТИ И РЕГУЛЯЦИИ УДЛИНЕННОГО «-10» rpsB-ПРОМОТОРА Escherichia coli in vivo

Аннотация:

Как мы показали ранее, транскрипция оперона rpsB-tsf, кодирующего жизненно важные компоненты трансляционного аппарата — рибосомный белок S2 и фактор элонгации Ts, направляется единственным промотором PrpsB, который высоко консервативен у гамма-протеобактерий. PrpsВ относится к классу удлиненных «— 10»-промоторов и включает TGTG-удпинение перед «—10»-гексамером ТАТААА, субоптимальную область «—35» (TTGGTG) и GC-богатый дискриминатор (GCGCGC), отделяющий «-10»-элемент от транскрипционного старта. В данной работе мы исследовали влияние направленных мутаций в rpsB-промоторной области на экспрессию репортерного гена PrpsB-lacZ в составе хромосомы Е. coli, а также регуляцию промотора транскрипционными факторами ppGpp и DksA при аминокислотном голодании. Показано, что уровень транскрипции зависит как OTTGTG-удлинения, так и от ТТG-элемента в области «—35», и мутации в этих природных последовательностях приводят к очень сильному снижению промоторной активности. При индукции аминокислотного голодания rpsB-промотор негативно регулируется ppGpp благодаря присутствию GC-богатого дискриминатора, замена которого на АТ-богатый элемент упраздняет строгий контроль. Эти и другие полученные данные показывают необходимость сочетания всех консервативных элементов rpsB-промоторa для эффективной и регулируемой транскрипции жизненно важного оперона rpsB-tsf.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2014
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2014.-N 8.-С.974-984. Библ. 42 назв.
Просмотров: 50