ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ ПОЛУЧЕНИЯ И ВЕДЕНИЯ КУЛЬТУР ФИБРОБЛАСТОВ КОЖИ И ДЕСНЫ ЧЕЛОВЕКА

Аннотация:

Для определения оптимальных условий получения культуры фибробластов из биопсийных образцов кожи и десны человека проведена сравнительная оценка 11 сывороток эмбрионов (плодов) крупного рогатого скота различных производителей, аутосыворотки человека, а также 3 бессывороточных (serum-free media, SFM) и 4 низко-сывороточных (serum-reduced media, SRM) образцов среды. Критерием оценки на этапе получения первичной культуры служила эффективность колониеобразования ОКО), а на последующих пассажах — время удвоения (Т1/2) клеточной популяции фибробластов. Результаты показали, что в зависимости от используемой сыворотки и питательной среды способность фибробластов кожи (Фк) формировать колонии может меняться в 4 и более раз, а фибробластов десны (Фд) в 1,5—1,8 раза. Проведенный клональный анализ показал, что фибробласты в культуре формируют три типа колоний, отличающихся по количеству и морфологии клеток. Соотношение типов колоний меняется в зависимости от используемой среды. При культивировании клеток установлено, что при использовании одной и той же среды (DMEM) добавление разных сывороток обеспечивает различное время удвоения клеточных популяций Фк и Фд. В целом, успех получения первичной культуры фибробластов обусловливается, в первую очередь, выбором питательной среды и сыворотки, обеспечивающими формирование крупных клеточных колоний, представленных фракцией быстро пролиферирующих клеток. При дальнейшей экспансии культуры главным становится использование сред, обеспечивающих высокую скорость роста клеточной популяции.

Авторы:

Издание: Гены @ Клетки
Год издания: 2014
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2014.-N 2.-С.53-60. Библ. 22 назв.
Просмотров: 68