ИЗМЕНЕНИЯ В СОСТАВЕ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА АР-1 В КЛЕТКАХ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ ФИБРОБЛАСТОВ КРЫСЫ, ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ ОНКОГЕНАМИ Е1А + Ha-Ras

Аннотация:

С использованием антител, способных вызывать образование высокомолекулярных комплексов (supershift) при анализе задержки олигонуклеотидов в геле (EMSA), исследован состав транскрипционного фактора АР-1 в эмбриональных фибробластах крысы, трансформированных онкогенами El A. + Ha-Ras. В качестве зондов использованы олигонуклеотиды АР-1, отличающиеся по связыванию димеров Fos/jun и jun/ATF, - AP-1coll(coll-TRE) и jun2-TRE соответственно. Состав комплекса АР-1 в трансформантах El A + Ha-Ras претерпевает значительные изменения. В отсутствие экспрессии гена c-fos, белок c-Fos замещается в трансформантах на белок Fra-1 и также факторы АТЕ-семейства (ATF-2, ATFa). Для анализа возможных механизмов подавления активности fos-промотора в клетках Е1 А + Ha-Ras получены популяции генетицин-устойчивых клонов, содержащих репортерные плазмиды -711fos-САТ и ее мутанты по сывороточно-зависимому элементу (SRE) и сАМР-зависимому элементу (CRE) fos-промотора. Поскольку только мутация в элементе SRE приводила к многократному увеличению активности интегрированной плазмиды -711fos-САТ, мы предполагаем, что подавление транскрипции гена c-fos при трансформации онкогенами Е1А + Ha-Ras обусловлено негативной регуляцией, осуществляемой через область SRE.

Авторы:

Издание: Молекулярная биология
Год издания: 1999
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 1999.-N 2.-С.261-267
Просмотров: 30