Высокоэффективная экспрессия гена аспартазы (L-аспартат-аммонийлиазы) в клетках Escherichia coli

Аннотация:

Осуществлены клонирование гена аспартазы (L-аспартат-аммонийлиазы) из природного изолята Escherichia coli ВКПМ В-7188 в составе плазмиды pLATE31 и его экспрессия под контролем промотора фага Т7 в клетках Escherichia coli BLR(DE3). Показано, что при оптимальных условиях содержание аспартазы в рекомбинантных клетках достигает 60% от суммы всех растворимых белков. При этом максимальная удельная активность клеток возрастает до 700 мкмоль/мг СВ/мин. Получены мутантные варианты, несущие ген аспартазы с делецией концевых последовательностей и кодирующие белки с повышенным уровнем аспартазной активности. Разработанная система высокоэффективной экспрессии гена аспаратазы может быть использована для отбора и быстрой оценки каталитических свойств мутантных форм фермента, генерируемых in vitro, а также для создания новых, более эффективных биокатализаторов синтеза L-аспарагиновой кислоты.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2014
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2014.-N 5.-С.19-24. Библ. 9 назв.
Просмотров: 33