КОНТАМИНАЦИЯ ПРИ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯХ: ПРОБЛЕМЫ И РЕШЕНИЯ

Аннотация:

Целью исследования было определение факторов риска получения ложноположителъных и ложноотрицательных результатов при ПЦР-анализе клинического материала. Источником ложноположителъных результатов могут быть образцы с высокой вирусной нагрузкой. Контаминация нуклеиновыми кислотами (НК) может произойти на любом участке ПЦР-исследования. На основании полученных данных мы установили, что наиболее чувствительным этапом является выделение и очистка НК, особенно если она проводится в ручном режиме. Если в одной постановке в подавляющем большинстве образцов детектируется положительный сигнал, это указывает на тотальную контаминацию. Но особую сложность представляют такие случаи, когда загрязненными оказываются лишь несколько образцов. Если в одной постановке присутствуют образец с высокой концентрацией вирусной НК и несколько проб с низкой концентрацией, следует провести их повторный анализ, начиная с этапа выделения НК. Обязательным этапом ПЦР-исследования в режиме реального времени является анализ кривых накопления продуктов амплификации: их формы и расположения на графике. Эти действия позволят исключить выдачу в клинические подразделения ложно отрицательных результатов тестирования. Все сделанные в работе выводы равноценны для ПЦР-тестирования любых НК-мишеней.

Авторы:

Издание: Клиническая лабораторная диагностика
Год издания: 2015
Объем: 17с.
Дополнительная информация: 2015.-N 1.-С.26-42. Библ. 9 назв.
Просмотров: 154