БИОХИМИЧЕСКАЯ И СТРУКТУРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА F0F1-АТФ-СИНТАЗЫ Streptomyces fradiae АТСС 19609

Аннотация:

Исследовано фосфорилирование белков в препаратах суббактериальных инвертированных мембранных везикул Streptomyces fradiae АТСС 19609, содержащих мембраносвязанные F0F1-АТФ-синтазы. Методом двумерного электрофореза с последующим масс-спектрометрическим анализом впервые установлено, что в составе синтазного комплекса осуществляется фосфорилирование р- и b-субъединиц; идентифицировано 20 белков с установленными функциями. Осуществлено клонирование генов F0F1-АТФ-синтазы в Escherichia coli и получены рекомбинантные белки всех восьми субъединиц: альфа, бета, гамма, дельта, s, a, b и с. С использованием суммарного препарата серин-треониновых протеинкиназ (СТПК) впервые показано фосфорилирование рекомбинантных гамма-, бета-, альфа- и эпсилон-субъединиц. В обоих типах экспериментов наблюдалось фосфорилирование бета-субъединицы F0F1-АТФ-синтазы. Отличия в фосфорилировании белков во фракции мембранных везикул и рекомбинантных белков могут быть связаны с присутствием разных СТПК в используемых препаратах, а также зависеть от этапов сборки и функционирования F0F1-АТФ-синтазы. Установлена структура оперона, содержащая все субъединицы и регуляторный белок I. Исследовано филогенетическое сходство субъединиц F0F1-АТФ-синтазы Streptomyces fradiae АТСС 19609 с субъединицами различных групп сапрофитных и патогенных бактерий (в т.ч. Mycobacterium tuberculosis). Полученные результаты могут указывать на значительную роль серин-треониновых протеинкиназ в функционировании F0F1-АТФ-синтазы. В практическом плане данные могут быть использованы для конструирования оригинальной тест-системы и создания новых биомишень-направленных лекарств против патогенных бактерий.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2015
Объем: 16с.
Дополнительная информация: 2015.-N 3.-С.358-373. Библ. 50 назв.
Просмотров: 68