ВЫДЕЛЕНИЕ, ОЧИСТКА И ХАРАКТЕРИСТИКА СТАБИЛЬНОГО ДЕФЕНСИН-ПОДОБНОГО ПРОТИВОГРИБКОВОГО ПЕПТИДА ИЗ СЕМЯН Trigonella foenum-graecum (ПАЖИТНИКА)

Аннотация:

Новый дефенсин-подобный противогрибковый пептид (Tf-AFP) с молекулярным весом 10,3 кДа был выделен из семян Trigonella foenum-graecum (пажитник) с использованием методов осаждения сульфатом аммония, ионообменной хроматографии, гель-фильтрации, гидрофобной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии с обратной фазой (RP-HPLC). Молекулярный вес очищенного пептида, определенный методом масс-спектрометрического анализа, оказался равным 10321,5 Да. Данный пептид проявлял высокое структурное сходство с растительными белками дефенсинами и другими противогрибковыми белками, обнаруженными при проведении поиска в базах данных. Двумерный электрофорез в ПААГ выявил р=8,8 и отсутствие изоформ. Полученный пептид Tf-AFP ингибировал рост различных видов грибов, таких как Fusarium oxysporum, Fusarium solani и Rhizoctonia solani. Противогрибковая активность подавлялась в присутствии 50 мМ NaCl. Методом кругового дихроизма было показано, что белок богат элементами бета-складчатой структуры и отличается высокой стабильностью в широком диапазоне температур. Интересно, что восстановление дисульфидных связей и денатурация химическими агентами не приводила к значительным изменениям вторичной структуры белка, что было подтверждено методами кругового дихроизма и флуоресцентной спектроскопии.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2015
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 2015.-N 3.-С.399-411. Библ. 25 назв.
Просмотров: 46