ЭКСТРАКЦИЯ ГИСТОНА HI И ДЕКОНДЕНСАЦИЯ ЯДЕРНОГО ХРОМАТИНА С РАЗНЫМИ Mg-ЗАВИСИМЫМИ УРОВНЯМИ ОРГАНИЗАЦИИ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ПОЛИГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ДИСТАМИЦИНА

Аннотация:

В условиях низкой ионной силы (20—25 мМ) и концентрации Mg2+ от 2 до 5 мМ хроматин в ядрах печени крысы имеет конденсированную структуру (глобулы 100—200 нм) и дает одинаковый сигнал КД (320—340 нм) при взаимодействии с антибиотиком дистамицином А (ДМ). Снижение концентрации Mg2+ до 1 мМ приводит к деконденсации хроматина до структур 30 нм и увеличению сигнала КД. Поли-(Ц)-глутаминовая кислота (ПГ) при ПГ/ДНК = 6 в присутствии 5 мМ Mg2+ экстрагирует только восьмую часть ядерного гистона HI, оставляя структуру хроматина конденсированной. Удаление одной четверти HI при 3 мМ Mg2+ приводит к деконденсации хроматина до фибрилл 30 нм. Экстракция около половины гистона HI в среде с [Mg2+] < 2 мМ разворачивает хроматин до нуклеосомного уровня. Деконденсация под действием ПГ приводит к значительному увеличению сигнала КД. Основная экстракция HI происходит за 1—2 мин, но при всех концентрациях Mg2+ выявляется более медленно экстрагируемая с помощью ПГ фракция HI, составляющая 5—7% ядерного Н1. Из оставшегося в ядре гистона Н1 около 25% может быть экстрагировано П Г в присутствии насыщающей концентрации ДМ (ДМ/ДНК=0,1). Выход Н1 существенно зависит от концентрации ПГ. Однако даже при высоких соотношениях ПГ/ДНК=30 и ДМ/ДНК=0,1 из ядра не удается удалить 5—10% гистона HI. Деконденсация хроматина в ядре не всегда пропорциональна экстракции гистона HI и ослабляется в присутствии положительно заряженного ДМ или больших концентраций ПГ. Наши результаты показывают, что взаимодействие ДМ с хроматином зависит, прежде всего, от уровня его упаковки, а действие ПГ — от концентрации Mg2+, поддерживающего данный уровень.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2015
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2015.-N 3.-С.427-438. Библ. 36 назв.
Просмотров: 21