Экспрессия в трансгенных растениях табака гена пептида М2е вируса гриппа птиц H5N1 в трансляционном слиянии с субъединицей Б рицина

Аннотация:

Пептид М2е вируса гриппа птиц H5N1 Curgan 2005 был успешно экспрессирован в трансгенных растениях табака. Нуклеотидная последовательность, кодирующая аминотерминальный участок белка М2 длиной 30 а.о., включающий пептид М2е (М130), была трансляционно слита в рамке считывания с З'-концом нуклеотидной последовательности субъединицы В рицина в векторе рВI121. Полученной конструкцией были успешно трансформированы растения табака. С помощью асиалофетуин-иммобилизованного ИФА показано присутствие субъединицы В рицина (RTB) в четырех линиях трансгенных растений из восьми изученных. Присутствие пептида М2е в составе слитого белка RTB-M130 было подтверждено в двух линиях трансгенных растений, в двух других линиях несмотря на присутствие RTB пептид М2е не детектировался. Методом количественного ИФА с иммобилизованным асиалофетуином показано, что накопление слитого белка RTB-M130 составило в этих линиях 3,3 и 2,4 мкг/г сырой массы листьев (0,02% и 0,01% от общего растворимого белка, соответственно). В линиях, где детектировалась экспрессия только гена RTB, его накопление было равно 2,1 и 2,4 мкг/г сырой массы (0,01 и 0,02% от общего растворимого белка, соответственно). Методом вестерн-блот-анализа показано, что ген белка RTB-M130 экспрессировался в растениях табака как димер без заметных признаков деградации. Полученные результаты будут в дальнейшем использованы для разработки на основе трансгенных растений съедобной вакцины против гриппа птиц.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2015
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2015.-N 2.-С.55-64. Библ. 31 назв.
Просмотров: 26