ИММУНОХИМИЧЕСКОЕ ОБНАРУЖЕНИЕ ГИСТОНОПОДОБНОГО БАКТЕРИАЛЬНОГО БЕЛКА HU В КОВАЛЕНТНО СШИТЫХ ДНК-БЕЛКОВЫХ КОМПЛЕКСАХ, ПОЛУЧЕННЫХ in vitro И in vivo

Аннотация:

Показано, что при УФ-облучении клеток Е. coli, трансформированных нлазмидой. белок HU образует ковалентную связь с плазмидной ДНК. Предложен метод выделения и очистки плазмиды с ковалентно связанными клеточными белками и модификация метода иммуноблотинга. позволяющая выявлять ковалентные ДНК-белковые комплексы. Эти подходы позволили идентифицировать белок HU в составе ДНК-белковых комплексов, образующихся в клетке при УФ-облучении. Полученные in vivo комплексы предполагается использовать для локализации контактов белка HU с определенными нуклеотидными последовательностями бактериальной ДНК. Белок HU - один из наиболее представленных в клетке бактерий белков, он связан с нуклеоидом и, по современным представлениям, участвует в компактизации ДНК. Белок HU связывается с ДНК неспецифически, он не обладает повышенным сродством к определенным нуклеотидным последовательностям, однако, как показано в модельных экспериментах, связывается предпочтительно с ДНК, обладающей измененной структурой, например, крестообразной ДНК, с апуриновыми участками или участками, имеющими однонитевые разрывы. В опытах in vitro показано также, что HU может модулировать (стимулировать или ослаблять) связывание с ДНК сайт-специфических белков, таких, как CRP , 1HF , репрессор Lex A. Эти наблюдения, а также способность изгибать ДНК в месте контакта, позволяют говорить о белке HU как об "архитектурном белке", который принимает участие в формировании сложных ДНК-мультибелковых комплексов, облегчая специфическое взаимодействие других белков с ДНК.

Авторы:

Издание: Молекулярная биология
Год издания: 1999
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 1999.-N 3.-С.442-446
Просмотров: 17