О ВЛИЯНИИ МОДУЛЯТОРОВ Са2+-АКТИВИРУЕМЫХ К+ КАНАЛОВ БОЛЬШОЙ ПРОВОДИМОСТИ НА КЛЕТКИ AS-30D АСЦИТНОЙ ГЕПАТОМЫ И ИЗОЛИРОВАННЫЕ МИТОХОНДРИИ ПЕЧЕНИ КРЫС, ПОДВЕРГАВШИЕСЯ ДЕЙСТВИЮ Cd2+

Аннотация:

АТФ-продуцирующие клеточные органеллы — митохондрии — первичная мишень для тяжелых металлов, являющихся важнейшими загрязнителями окружающей среды и причиной различных заболеваний и патологий. Установлено, что механизм токсического действия тяжелых металлов включает в себя изменения во внутриклеточной продукции активных форм кислорода и митохондриальную дисфункцию, обусловленную нарушениями функционирования дыхательной цепи и активацией Са2+-зависимой неселективной поры во внутренней мембране митохондрий. Роль других ионных каналов, в частности таких селективных калиевых каналов, как Са2+-активируемые калиевые каналы большой проводимости, ВК(Са), несущих защитную функцию в клетке, до сих пор мало исследована. В настоящей работе на клетках асцитной гепатомы AS-30D и изолированных митохондриях печени крысы мы изучили действие различных эффекторов ВК(Са) в присутствии и в отсутствие ионов Cd2+ в инкубационной среде, а именно влияние двух его активаторов — NS1619 и NS004, и одного блокатора — паксиллина. Было обнаружено, что после 24-часовой инкубации AS-30D клеток как с NS1619, так и с NS004, взятыми в концентрации 10 мкМ, число апоптотических клеток достоверно увеличилось по сравнению с контролем; более того, наличие этих ВК(Са) активаторов в среде инкубации оказывало аддитивный эффект на Сd2+-индуцированный апоптоз AS-30D клеток. Та же концентрация NS1619 и NS004 не влияла достоверно на дыхание AS-30D клеток через 3, 24 и 48 ч инкубации, однако через 3 ч вызывала увеличение внутриклеточной продукции активных форм кислорода (АФК). В экспериментах на изолированных митохондриях печени крысы NS1619 и NS004, добавленные в той же концентрации в КС1-содержащую среду, не влияли на скорости дыхания в состоянии 3 по Чансу и максимально разобщенного дыхания (как в присутствии, так и в отсутствие Cd2+); одновременно они вызывали слабое разобщающее действие, ускоряя базальное дыхание и дыхание в состоянии покоя (состояние 4 по Чансу), а также усиливали высокоамплитудное набухание митохондрий, индуцированное Cd2+ в этой среде. Было показано, что паксиллин (в концентрации 1 мкМ) снижал смертность AS-30D клеток после 3-, 24- и 48-часовой инкубации в присутствии Cd2+ и вызывал усиление внутриклеточной продукции АФК в контроле через 3 и 24 ч воздействия. Паксиллин, взятый в концентрации, оказывающей долговременный защитный эффект, не влиял на дыхание AS-30D клеток и изолированных митохондрий печени крысы (как в присутствии, так и в отсутствие Cd2+) и не снижал набухание митохондрий, обнаруженное в присутствии Cd2+ и активаторов ВК(Са). Возможные молекулярные механизмы действия ВК(Са) модуляторов обсуждаются.

Авторы:

Издание: Журнал эволюционной биохимии и физиологии
Год издания: 1996
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2015.-N 4.-С.225-235. Библ. 54 назв.
Просмотров: 39