NAT-технологии в скрининге донорской крови. Опыт работы ПЦР-лаборатории КГБуЗ «КСПК»

Аннотация:

Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы трансфузиологии Дальневосточного федерального округа». Вирусная безопасность гемотрансфузий остается одной из наиболее острых проблем Службы крови. В ее основе лежит качественный отбор доноров, тестирование их крови на маркеры гемотрансмиссивных вирусных инфекций и карантинизация плазмы. При проведении серологического скрининга донорской крови в России используют наборы реагентов для выявления HBsAg вируса гепатита В (ВГВ), антител к вирусу гепатита С (ВГС), антител к вирусу иммунодефицита человека I и II типа (ВИЧ-1, ВИЧ-2) и антигена р24 ВИЧ-1 методом иммуноферментного анализа (ИФА). Однако эти тесты не могут обеспечить 100% установление инфицированных доноров, поскольку в их крови в период так называемого «серонегативного окна» данные маркеры инфекций отсутствуют. Сократить это окно для гепатита В в 1,5 раза, для гепатита С - в 3 раза, а ВИЧ-инфекции - в 5 раз, и значительно снизить риск передачи возбудителей этих инфекций через донорскую кровь и ее препараты позволяет тестирование донаций с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР). В России с 2008 г. введено дополнительное обследование NAT-методами доноров крови, которое позволяет выявить и своевременно отвести от последующих донаций вирусоно-сителей, в крови которых не обнаружены серологические маркеры гемотрансмиссивных инфекций, и, тем самым, снизить вероятность посттрансфузионной передачи гемотрансмиссивных инфекций, в первую очередь за счет некарантинизируемых компонентов крови. В КГБУЗ «Краевая станция переливания крови» МЗ Хабаровского края лаборатория ПЦР была открыта в декабре 2012 г. на базе клинико-диагностической лаборатории. Основной целью деятельности ПЦР-отдела КДЛ является проведение скрининга донорской крови и ее продуктов для обеспечения безопасности гемотрансфузий. ПЦР-отдел КДЛ выполняет молекулярно-биологические исследования согласно приказу МЗ РФ № 64 от 21.02.2000 г. «Об утверждении номенклатуры клинических лабораторных исследований», а именно: молекулярно-биологические исследования биологического материала от человека с вирусами II группы патогенности: - парентерального гепатита В; - парентерального гепатита С; - вирус иммунодефицита человека ВИЧ-1, ВИЧ-2. Работа ПЦР-отдела лаборатории организована в соответствии с МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I—IV групп патогенности», введенными в действие 5 апреля 2010 г. Материал для исследований поступает в ИФА-подразделение КДЛ, где проводится его разбор, регистрация и первичная обработка. Доставка материала в ПЦР-отдел осуществляется в пластиковых пробирках с герметически закрытыми крышками в специальных контейнерах, имеющих специальную маркировку и знак «биологическая опасность» (п. 2.4.1 СП 1.3.2322-08). По разработанному в клинико-диагностической лаборатории КГБУЗ «КСПК» алгоритму образцы проб крови первичных доноров поступают для ПЦР-исследования только после получения отрицательных результатов исследования методом ИФА, образцы крови активных доноров при необходимости исследуются методом ПЦР параллельно с проведением ИФА (заготовка некарантинизируемых компонентов крови, а также компонентов с коротким сроком годности (концентрат тромбоцитов)). Оборудование для проведения подготовки реагентов для выполнения ПЦР-исследований выполнено в виде закрытых боксов биологической безопасности II класса, с ламинарным движением воздушного потока и фильтрацией воздуха НЕРА-фильтрами, встроенными УФ-лампами для обеззараживания, что соответствует п. 2.3.31 СП 1.3.2322-08. Все исследования выполняются в полуавтоматическом режиме с использованием автоматической станции для раскапывания жидкостей Freedom EVO 100/4 Тесап, которая проводит пулирование образцов сыворотки донорской крови с формированием минипулов по 5-8 образцов в каждом и этап пробоподготовки, целью которого является концентрирование

Авторы:

Издание: Здравоохранение Дальнего Востока
Год издания: 2015
Объем: 2с.
Дополнительная информация: 2015.-N 2.-С.109-110. Библ. 0 назв.
Просмотров: 283