СИНТЕТАЗА ЦЕФАЛОСПОРИНОВ-КИСЛОТ ШТАММА Escherichia coli ВКПМ В-10182: ГЕНОМНЫЙ КОНТЕКСТ, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГЕНА, СОЗДАНИЕ ШТАММА-ПРОДУЦЕНТА

Аннотация:

Ферментсинтетаза цефалоспоринов-кислот продуцируется штаммом Е. coli ВКПМ В-10182, обладает специфичностью к синтезу бета-лактамных антибиотиков, относящихся к классу цефалоспоринов-кислот (цефазолин, цефалотин, цефтезол и др.). Проведено сравнение ранее расшифрованной геномной последовательности штамма Е. coli ВКПМ В-10182 с геномом родительского штамма Е. coli АТСС 9637. Выявлены множественные мутации, свидетельствующие о долгой селекционной истории штамма, в том числе мутации в генах РНКаз и бета-лактамаз, которые могли способствовать повышению уровня синтеза фермента и снижению степени деградации синтезируемых цефалоспоринов-кислот. Методами биоинформатики идентифицирован ген CASA — прямой гомолог гена пенициллин G-ацилазы, что подтверждено результатами клонирования гена, его экспрессии и определения ферментативной активности в реакции синтеза цефазолина. Ген CASA выделен и клонирован в оригинальный вектор экспрессии, в результате чего получен эффективный штамм Е. coli BL21(DE3)/pMD0107-продуцент CASA.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2015
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2015.-N 5.-С.465-471. Библ. 31 назв.
Просмотров: 47