ВЫЯВЛЕНИЕ АНТИТЕЛ К АНТИГЕНАМ ТРОФОЗОИТОВ ЛЯМБЛИЙ ИММУНОФЕРМЕНТНЫМ МЕТОДОМ

Аннотация:

Лямблиоз - широко распространенное заболевание человека, вызываемое простейшим Lamblia intestinalis. Лямблии инМатериалы и методы. Трофозоиты лямблий получали из тонкой кишки мышей-сосунков, зараженных per os суспензией цист, выделенных из фекалий больных лямблиозом людей. Трофозоиты отмывали в физиологическом растворе и осаждали центрифугированием при 500 g 30 мин, затем суспендировали в 0,01 М натрий-фосфатном буфере, рН 7,5, содержащем 0,15 М хлорида натрия, добавляли дезоксихолат натрия до концентрации 1% и выдерживали при перемешивании 1 час при комнатной температуре. Осадок отделяли центрифугированием (5000 g, 30 мин). Центрифугат разбавляли в 100 раз 0,01 М натрий-фосфатным буфером, рН 7,5, и хроматографировали на анионообменнике Полисил СА-500. Элюцию белков проводили линейным градиентом фосфата натрия (0,01-0,3 М), рН 7,0, и фракции, содержащие белки, реагирующие с сыворотками больных лямблиозом, объединяли. Анализ полученного антигена проводили электрофорезом в 12,5% ПААГ по. Иммуноферментный анализ (ИФА) проводили непрямым твердофазным методом с использованием конъюгата моноклональных антител против иммуноглобулинов человека с пероксидазой хрена (ЗАО <Вектор-Бест>, г.Новосибирск), который позволяет выявлять антитела IgG, IgA и IgM классов. В качестве положительного контроля использовали смесь 30 сывороток людей, больных лямблиозом (диагноз установлен с помощью микроскопии дуоденального содержимого). В качестве отрицательного контроля использовали смесь 50 сывороток здоровых доноров крови, не содержащих антител к трофозоитам лямблий. Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета прикладных программ EpiInfo 6, версия 6.04b.

Авторы:

Издание: Медицинская паразитология и паразитарные болезни
Год издания: 1999
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 1999.-N 1.-С.46-48
Просмотров: 51