Проведение нового токсикологического анализа состояния эпителиальных клеток с использованием свиной роговицы

Аннотация:

Целью исследования доктора Takahashi была разработка нового первичного токсикологического анализа состояния эпителиальных клеток свиной роговицы с использованием бензалкония хлорида (БАХ). Энуклеированные глаза свиньи были доставлены в лабораторию в течение 24 ч. после забоя животных. Трепаном диаметром 2,0 мм выкраивали лоскут на 1/4 толщины роговицы. Остаточные ткани были рассечены скальпелем, строму отрезали микрохирургическими ножницами до получения плоской поверхности. Образцы стерилизовали в 10% растворе повидон-йодина в течение 4 мин., после чего промывали в фосфатном буферном растворе (ФБР) в течение 10 мин. Пять образцов поместили в чашки для культивирования, покрыли коллагеном (тип I) и выдерживали в питательной в среде, содержащей фетальную телячью сыворотку, эпидермальный фактор роста и 1% раствор пенициллина-стрептомицина, при температуре 37°С в присутствии С02 (5%). В исследовании применяли БАХ, растворенный в ФБР в 4 концентрациях: 0,00001 %, 0,0001 % , 0,001 % и 0,01%. После инкубации образцов в питательной среде в течение 12 ч. ее убирали и наливали БАХ, растворенный в 50 мл ФБР, в 4 концентрациях на 2 мин. После трехкратного промывания роговиц в ФБР, образцы снова помещали в питательную среду на 24 ч. Затем их фотографировали для измерения зоны разрастания.

Авторы:

Издание: Новое в офтальмологии
Год издания: 2015
Объем: 2с.
Дополнительная информация: 2015.-N 4.-С.8-9. Библ. 0 назв.
Просмотров: 19