АРТЕФАКТЫ, ВОЗНИКАЮЩИЕ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ БУФЕРА, БЛОКИРУЮЩЕГО FC-РЕЦЕПТОРЫ ЛЕЙКОЦИТОВ

Аннотация:

Fcy-рецепторы (FcyR) представляют гетерогенную группу рецепторов, связывающих Fc-фрагмент иммуноглобулинов G (IgG) и обеспечивающих важную связь клеточного и гуморального иммунитета.Fc-рецепторы экспрессируются на разных клетках, включая моноциты, гранулоциты, В-клетки и дендритные клетки . Рецепторы для IgG включают три основных класса: CD64, CD32, CD16 . Блокирующий буфер "Human TruStain FcX" разработан специально для блокирования нежелательного усиления флюоресценции за счет неспецифического связывания моноклональных флюоресцентно-меченных антител с Fc-рецепторами. Этот буфер содержит специализированные IgG человека. Клетки, экспрессирующие Fc-рецепторы, иногда дают неверные позитивные или негативные результаты иммунофлюоресцентного окрашивания вследствие связывания Fc-фрагментов lg с Fc-рецепторами. Для исключения этих эффектов целесообразно использование блокирующего буфера "Human TruStain FcX" или набора антител: anti-human CD16 (clone 3G8), CD32 (clone FUN-2) и CD64 (clone 10.1). Цель данного исследования — определить влияние блокирующего буфера "Human TruStain FcX" на результаты измерения уровня TLR4 на поверхности моноцитов, содержание NF-кВ р50 в цитоплазме моноцитов, а также на синтез цитокинов (TNF-oc) в экспериментах на изолирован ных моноцитах и в цельной крови человека. Изучено влияние буфера "Human TruStain FcX", блокирующего Fcy-рецепторы, в экспериментах по определению уровня TLR4 с помощью меченых моноклональных антител, внутриклеточному иммунофлюоресцентному окрашиванию NF-кВ р50 и синтезу TNF-a на изолированных моноцитах и в цельной крови человека. Необходимо учитывать влияние блокирующего буфера на измеряемые параметры и целесообразность его использования в экспериментах с изолированными клетками и цельной кровью.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2016
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2016.-N 8.-С.210-213. Библ. 11 назв.
Просмотров: 109