ИДЕНТИФИКАЦИЯ БЕЛКОВ, ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ КОТОРЫХ С Na+,К+ -АТРазой АКТИВИРУЕТСЯ УАБАИНОМ

Аннотация:

Ранее было показано, что длительное выдерживание в присутствии уабаина и других кардиотонических стероидов приводит к смерти различных клеток эпителия — клеток эпителия почечных канальцев собаки (MDCK), эндотелия сосудов аорты свиньи (РАЕС) и пупочной вены человека (HUVEC), цервикальной аденокарциномы (HeLa) и аденокарциномы толстого кишечника (Сасо-2). Интермедиаты сигнального каскада, приводящие к смерти клеток, остаются неизвестными. В настоящем исследовании мы использовали методы протеомики для идентификации белков, взаимодействие которых с Na+,K+-АТРазой активируется уабаином. После выдерживания клеток Сасо-2 в течение 3 ч в присутствии 3 мкМ уабаина были получены лизаты клеток и проведена иммунопреципитация Na+,К+-АТРазы в комплексе со взаимодействующими белками с использованием антител против aльфа1-субъединицы фермента. Белки иммунопреципитатов были разделены методом двумерного ПААГ-электрофореза, в результате чего выявлен ряд белков с молекулярными массами 71—74, 46, 40—43, 38 и 33—35 кДа, связывание которых с Na+, К+-АТРазой активируется уабаином. Анализ методом масс-спектрометрии позволил идентифицировать часть из них, включая семь сигнальных белков из суперсемейств глюкокортикоидных рецепторов, серин/треониновых протеинкиназ и фосфатаз 2С, Src- и Rho-GTPa3. Обсуждается возможная роль этих белков в активации сигнального каскада, приводящего к смерти клеток.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2016
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2016.-N 9.-С.1269-1279. Библ. 48 назв.
Просмотров: 42