КАРИОТИПИРОВАНИЕ AMOEBA PROTEUS

Аннотация:

В статье приведен разработанный нами способ получения спрэдов митотических хромосом Amoeba proteus и описан процесс кариотипирования этого вида амеб. Настоящий протокол позволяет получать расправленные хромосомы с характерным рисунком хромомеров у индивидуальных хромосом. Показано, что в метафазе митоза у амеб штамма В (один из типовых штаммов A. proteus в Коллекции штаммов свободноживущих амеб Института цитологии РАН) содержится 27 пар хромосом. Установлено, что рисунок хромомеров является хромосомоспецифичным признаком. Представлена типовая кариограмма и банк изображений DAPI- и YoYol-бэндированных индивидуальных хромосом амеб штамма В, составленной из 5 разных спрэдов митотических клеток. Несмотря на более чем двухвековую историю изучения амеб, относящихся к виду Amoeba proteus, целый ряд ключевых моментов в биологии этих одноклеточных организмов остается нерасшифрованным. Так, все многочисленные попытки определить число хромосом этих облигатно агамных простейших, предпринимавшиеся ранее, нельзя признать удовлетворительными. До сих пор принято считать, что число хромосом A. proteus достигает 500 или более, но эти данные носят лишь предположительный характер. Дело в том, что изучение кариотипа A. proteus вплоть до последнего времени наталкивалось на три казавшихся непреодолимыми препятствия. Во-первых, для описания кариотипа пригодны только метафазные клетки, количество которых в асинхронной лабораторной культуре A. proteus весьма незначительно. Их число можно приблизительно оценить через соотношение длительности всего клеточного цикла и метафазы митоза. Клеточный цикл у амеб этого вида, культивируемых в оптимальных условиях, составляет 40—70 ч при 17—25°С. При этом длительность метафазы митоза, согласно данным прижизненных наблюдений, не превышает 5 мин (Chalkley, Daniel, 1933). Однако в действительности эта стадия, видимо, еще короче, поскольку на профазу, по результатам той же работы, приходится около 10 мин. Согласно нашим экспериментальным данным, соотношение профазных и метафазных клеток на цитологических препаратах A. proteus штамма

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2016
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2016.-N 12.-С.971-976. Библ. 0 назв.
Просмотров: 34