Масс-спектрометрическое определение изотипа кор-антигена вируса гепатита С.

Аннотация:

Цель. Предложить способ определения изоформы кор-антигена вируса гепатита С в сыворотке крови человека. Материалы и методы. Материалом исследования служили образцы сывороток крови, полученные от пациентов, инфицированных вирусным гепатитом С по данным ПЦР. С помощью аффинных реагентов, в качестве которых выступали плоские чипы с иммобилизованными на поверхности моноклональными антителами против кор-антигена вирусного гепатита С, осуществлялось концентрирование целевого белка. Регистрацию пептидных фрагментов молекул, сконцентрированных на поверхности плоских чипов, выполняли на времяпролетном масс-спектрометре Autoflex III МАШ1-ТОРЯОР (Bruker Daltonics, Германия). Идентификацию белков проводили с помощью протеомной поисковой машины Mascot с достоверностью более 95%. Результаты. Было проведено обогащение поверхности аффинных реагентов молекулами кор-антигена из пятнадцати образцов сыворотки крови пациентов, инфицированных вирусным гепатитом С, с последующей прямой масс-спектрометрической идентификацией. В 14 образцах были выявлены изоформы кор-антигена Q8V7V3, Q66VB3, 071242, соответствующие генотипу 1Ь и изоляту HC-J2, в одном образце - изоформа Q68692, соответствующая генотипу 2с, изоляту HC-J7. В большинстве образцов сывороток крови (в 12 образцах из 15) была выявлена изоформа Q8V7V3. Гомологичность аминокислотных последовательностей всех четырех изоформ составила 89-96%. Заключение. Предложен новый способ определения изоформы кор-антигена вирусного гепатита С в образцах биоматериала. Способ основан на комбинации специфического обогащения поверхности аффинных реагентов молекулами целевого белка с последующей масс-спектрометрической идентификацией. Масс-спектрометрический анализ позволяет не только достоверно идентифицировать кор-антиген вирусного гепатита С в образце биоматериала, но и определить его изоформу.

Авторы:

Издание: Инфекционные болезни
Год издания: 2016
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2016.-N 4.-С.51-55. Библ. 19 назв.
Просмотров: 25