КОНТАМИНАЦИЯ ПРЕПАРАТОВ ЭКЗОСОМ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ

Аннотация:

Целью нашей работы было привлечь внимание исследователей к проблеме контаминации препаратов экзосом. Мы изучали в просвечивающем электронном микроскопе JEM-1400 ("JEOL", Япония) препараты экзосом, выделенные с помощью последовательных центрифугирований по принятым схемам из различных биологических жидкостей: плазмы и мочи здоровых и больных онкологическими заболеваниями людей, сыворотки крупного рогатого скота и культуральной жидкости (клетки линий MDCK, MDA-MB и MCF-7). Все препараты (более 200) содержали экзосомы (везикулы), идентифицированные методом иммунно-электронной микроскопии по связыванию с антителами к тетраспанинам CD63 или CD9. Кроме экзосом, во всех исследованных препаратах присутствовали контаминирующие структуры низкой электронной плотности, не имеющие ограничивающей мембраны и, соответственно, не являющиеся экзосомами ("не-везикулы"). Отмечены два основных типа "не-везикул": имеющие размер 20-40 нм и составляющие 10-40% всех структур препаратов экзосом, и имеющие размер 40-100 нм. Морфология "не-везикул" позволяет отнести их к липопротеинам промежуточной и низкой плотности (20-40 нм) и очень низкой плотности (40-100 нм). Последние идентичны по размеру экзосомам. Наибольший уровень контаминации отмечен в препаратах экзосом крови. Полученные данные указывают на необходимость контролировать состав препаратов экзосом с помощью электронной микроскопии и учитывать присутствие контаминирующих структур при анализе и интерпретации результатов исследования.

Авторы:

Издание: Биомедицинская химия
Год издания: 2017
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2017.-N 1.-С.91-96. Библ. 16 назв.
Просмотров: 55