Восприимчивость к агробактериальной трансформации мезокотилей кукурузы и регенерация из них растений в культуре in vitro

Аннотация:

Исследовали компетентность к агробактериальной трансформации мезокотилей кукурузы линий 4766, РБ-179, L-1 и L-2 и условия регенерации из них растений. Регенерацию мезокотилей кукурузы наблюдали на средах с различным сочетанием ауксинов и цитокининов. Эффективность этого процесса зависела от качественного и количественного состава регуляторов роста. Частота регенерировавших эксплантов и среднее количество побегов, образовавшихся на одном экспланте, увеличивались с повышением концентрации цитокинина 6-БАП и дефолианта Дропп (тидиазурон) в среде. Наиболее эффективными для регенерации мезокотилей являются 6-БАП (3-5 мг/л) и Дропп (3 мг/л) в сочетании с ауксинами (ИУК - 0, 5 мг/л и 2,4-Д - 2 мг/л). Количество регенерировавших эксплантов достигало 59,0 %, а среднее число побегов на эксплант - 7,5 за шесть недель культивирования. Укоренение и доращивание регенерировавших побегов успешно проводили на среде МС с добавлением 0,2 мг/л ИМК. С целью определения компетентности мезокотилей была проведена их генетическая трансформация штаммом AGLO Agrobacterium tumefaciens, содержащим генетическую конструкцию pVecActl-GUS, которая кодирует репортерный ген uidA под контролем промотора гена актина (ActГ) риса и содержит селективный ген hptll, определяющий устойчивость к гигромицину. У некоторых регенерантов, устойчивых к селективному агенту, методом ПЦР показано наличие вставки гена hptll в геном растения. Таким образом, установлена возможность использования мезокотилей кукурузы в качестве эксплантов для агробактериальной трансформации.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2017
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2017.-N 1.-С.62-71. Библ. 26 назв.
Просмотров: 30