МОДИФИКАЦИЯ МЕТОДИКИ ПОЛУЧЕНИЯ ИНСЕРЦИОННЫХ МУТАНТОВ С ПОМОЩЬЮ СИСТЕМЫ EZ::TN5

Аннотация:

Показана возможность использования модифицированной методики получения инсерционных мутантов с помощью системы EZ::TN5 при культивировании реципиентного штамма на плотной питательной среде и исключении этапа центрифугирования. Частота образования транспозонных вариантов Е. coli 10979/EZ::TN5 составила 2х10~6. Генетически измененные штаммы характеризовались устойчивостью к канамицину, отсутствием способности к ассимиляции L-малата, изменениями в экспрессии отдельных протеинов белковых масс-спектров (5096.3, 6252.9 и 9067.7 Д) и наличием фрагментов в геномной ДНК, амплифицированных с помощью специфичных прямых и обратных праймеров, гомологичных сайтам посадки транспозона Тп5. Модифицированная методика получения инсерционных мутантов с помощью системы EZ::TN5 не уступает по эффективности таковой при соблюдении стандартных условий, сокращает время эксперимента и упрощает его, а также позволяет снизить риск при работе с микроорганизмами II группы патогенности.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2017
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2017.-N 4.-С.524-528. Библ. 11 назв.
Просмотров: 22