ФЕМТО- И ПИКОСЕКУНДНАЯ ДИНАМИКА ПЕРВИЧНЫХ РЕАКЦИЙ РЕКОМБИНАНТНОГО БАКТЕРИОРОДОПСИНА В СРАВНЕНИИ С ПРИРОДНЫМ БЕЛКОМ В ТРИМЕРНОМ И МОНОМЕРНОМ СОСТОЯНИЯХ

Аннотация:

Динамика образования первичных интермедиатов фотоцикла рекомбинантного бактериородопсина (БРрек) была исследована методом фемтосекундной абсорбционной лазерной спектроскопии с разрешением 25 фс. БРрек был получен в экспрессионной системе Е. coli. Поскольку БРрек был получен в мицеллярной системе DMPC-CHAPS в мономерном состоянии, было проведено его сравнение с тримерной и мономерной формами природного бактериородопсина (БРтрим и БРмон соответственно). Показано, что интермедиат /БРрек (возбужденное состояние) образуется в пределах 100 фс, как и у образцов БРтрим и БРмон. Дальнейшие процессы, а именно распад возбужденного состояния БРрек и образование интермедиатов и К, происходят несколько медленнее по сравнению с БРтрим, но близки по своим характеристикам к БРмон. Время жизни интермедиата I, судя по сигналу дельтаАesa (470-480 нм), составило 0,68 пс (78%) и 4,4 пс (22%) для БРрек, 0,52 пс (73%) и 1,7 пс (27%) для БРмон и 0,45 пс (90%) и 1,75 пс (10%) для БРтрим. Время образования интермедиата К, судя по сигналу Д/4С5а(625—635 нм), составило 13,5 пс для БРрек, 9,8 пс БРмон и 4,3 пс для БРтрим. Также наблюдается некоторое уменьшение эффективности фотореакции БРрек и БРмон по сравнению с БРтрим, что видно по падению поглощения интермедиата К в дифференциальном спектре на ~14%. Поскольку БРрек по своим фотохимическим свойствам близок к природному белку в мономерном состоянии, то БРрек и его мутантные формы могут служить основой для дальнейшего изучения механизма функционирования бактериородопсина.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2017
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 2017.-N 4.-С.664-676. Библ. 55 назв.
Просмотров: 17