Получение и характеристика рекомбинантных белков р 17 и р54 вируса африканской чумы свиней в клетках млекопитающих

Аннотация:

Представлены данные по получению структурных иммунодоминантных рекомбинантных белков р17 и р54 вируса африканской чумы свиней в эукариотической системе экспрессии (клетках млекопитающих). Полноразмерные копии генов D117L (р17) и E183L (р54) клонировали в экспрессирующем векторе pGFP-Nl под контролем цитомегаловирусного промотора. Наличие рекомбинантных вставок и их ориентация подтверждены рестрикционным анализом и нуклеотидным секвенированием. Уровень продукции рекомбинантных белков и их локализация в трансфицированных клетках COS-1 и НЕК-293Т/17 определена флуоресцентной микроскопией белков pi 7GFP и p54GFP. Показана функциональная активность рекомбинантных белков с использованием поликлональных антител к вирусу АЧС. В результате исследований достоверно определена цитоплазматическая локализация белков р17 (D117L) и р54 (E183L), которая не изменяется в течение всего периода экспрессии. Полученные белки могут специфически взаимодействовать с антителами к вирусу АЧС, что позволяет использовать их в иммунологических реакциях.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2017
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2017.-N 2.-С.41-47. Библ. 22 назв.
Просмотров: 31