ХАРАКТЕРИСТИКА ДВУХ ЛИНИЙ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ ВАРТОНОВА СТУДНЯ ПУПОЧНОГО КАНАТИКА ЧЕЛОВЕКА

Аннотация:

Получены две новые неиммортализованные линии человека из Вартонова студня пупочного канатика разных доноров, названные MSCWJ-1 и MSCWJ-2. Проведен анализ ростовых характеристик и дифференцировочного потенциала этих линий и подтвержден для них статус мезенхимных стволовых клеток (МСК). Основные характеристики получены на 6-м пассаже. Среднее время удвоения клеточных популяций обеих линий одинаково и составляет 26.8 ч. Кривые роста свидетельствуют об активной пролиферации этих линий, но есть различия в длительности активной (логарифмической) фазы роста. Эффективность клонирования низкая, но одинаковая для обеих линий. Существенно различается время вступления в фазу репликативного старения. Клеточная линия MSCWJ-2 вступает в фазу активного старения гораздо раньше (13-й пассаж), чем клеточная линия MSCWJ-1 (20—25 пассажи). Морфологический анализ показывает типичные для фазы старения изменения, связанные с увеличением размера и степенью распластанности клеток. Количественный кариотипический анализ показал, что линии имеют нормальный кариотип 46, XX и 46, XY соответственно. Структурный кариотипический анализ показал существенные различия между линиями. Линия MSCWJ-2 имеет клональную перестройку короткого плеча хромосомы 7 в 28 % исследованных клеток в отличие от линии MSCWJ-1, у которой незначительное количество неклональных хромосомных перестроек. Для определения статуса линий провели анализ поверхностных маркеров с помощью проточной цитофлуориметрии. Анализ выявил в обеих линиях экспрессию поверхностных антигенов, характерных для МСК человека (CD44, CD73, CD90, CD 105, HLA-ABC и виментин), и отсутствие экспрессии CD34, CD45 и HLA-DR. В обеих линиях показана экспрессия маркеров недифференцированных эмбриональных клеток человека (ЭСК) — SSEA-4 и SOX2. Обе линии экспрессируют маркеры ранней дифференцировки ЭСК в производные трех зародышевых листков. Показана способность обеих линий дифференцироваться в остеогенном, хондрогенном и ади-погенном направлениях, что также подтверждает статус МСК. В отличие от линии MSCWJ-2 в линии MSCWJ-1 имеет место спонтанная эндотелиальная дифференцировка. Наблюдаемые межлинейные различия по некоторым характеристикам требуют продолжения исследований динамики кариотипической изменчивости при длительном культивировании и сопоставления полученных результатов с процессами старения этих линий, а также проведения сравнительного анализа ряда других характеристик МСК на ранних и поздних пассажах.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2017
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 2017.-N 5.-С.315-327. Библ. 70 назв.
Просмотров: 37