МикроРНК-630 СДЕРЖИВАЕТ ЭПИТЕЛИАЛЬНО-МЕЗЕНХИМАЛЬНУЮ ТРАНСФОРМАЦИЮ, КОНТРОЛИРУЯ ЭКСПРЕССИЮ FoxMl В КЛЕТКАХ РАКА ЖЕЛУДКА ЧЕЛОВЕКА

Аннотация:

Исследовали функциональную роль микроРНК (miR)-630 в эпителиально-мезенхимальноой трансформации (ЭМТ) клеток рака желудка (РЖ) и механизм действия этой miРНК. В клетки РЖ человека линии SGC 7901 трансфицировали искусственную miR-630 или ингибитор miR-630. Эффективность трансфекции контролировали с помощью количественной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РВ-ПЦР). Клеточную миграцию и инвазию изучали методом межкамерного перехода клеток. Трансляционную экспрессию Е-кадерина, виментина и вильчатоглавого бокс белка (FoxMl) определяли методом Вестерн-блоттинга. Кроме того, осуществляли оверэкспрессию и подавление экспрессии белка FoxMl, и при этом проверяли влияние аномальной экспрессии (оверэкспрессия или ингибирование экспрессии) miR-630 на ЭМТ и на миграцию и инвазию клеток РЖ, а также определяли уровни трансляции белковых факторов сигнального пути Ras/фосфоинозитид 3-киназа (Р13К)/АКТ. В результате исследования установлено следующее: 1) ЭМТ и способность к миграции и инвазии у клеток РЖ достоверно снижались по сравнению с контролем в результате оверэкспрессии miPHK-630, но заметно возрастали при подавлении экспрессии miPHK-630 (все значения р < 0,05); 2) аномальная экспрессия белка FoxMl приводила к обращению результатов этих воздействий miR-630 в клетках РЖ (все значенияр < 0,05); 3) продукция белков GTP-Racl, р-Р13К и р-АКТ снижалась при оверэкспрессии miR-630, но возрастала при оверэкспрессии FoxMl; 4) значительного снижения уровней трансляции белков GTP-Rac1, р-РI3К и р-АКТ, вызванного оверэкспрессией miR-630, не наблюдалось, если одновременно с miR-630 происходила оверэкспрессия FoxM1. Полученные данные свидетельствуют о том, что miR-630 может выступать в качестве сдерживающего противоопухолевого агента в клетках РЖ. Эта miPHК тормозит ЭМТ, контролируя белок FoxM1 в клетках РЖ, по-видимому, путем инактивации сигнального пути Ras/PI3K/AKT.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2017
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2017.-N 6.-С.934-943. Библ. 53 назв.
Просмотров: 38