СИГНАЛЬНАЯ ПЕПТИДАЗА ИЗ Escherichia coli РАСПОЗНАЕТ И РАСЩЕПЛЯЕТ СИГНАЛЬНУЮ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ АРХЕЙ

Аннотация:

Открытая рамка считывания гена Тк1884 из Thermococcus kodakarensis, кодирующая альфа-амилазу, была клонирована вместе с нативной сигнальной последовательностью и экспрессирована в клетках Escherichia coli. Гетерологичная экспрессия гена привела к секреции рекомбинантного белка в культуральную среду внеклеточная активность альфа-амилазы после индукции постепенно возрастала. Белок Тк1884 был выделен из культуральной среды. При определении его молекулярной массы с помощью метода масс-спектрометрии с ионизацией электронапылением было обнаружено отщепление нескольких аминокислотных остатков. В связи с этим была определена N-концевая последовательность очищенного белка Тк1884, которая показала, что сигнальный пептид подвергся расщеплению пептидной связи между остатками Ala26 и Ala27 сигнальной пептидазой Е. coli. По нашим сведениям, это первая работа, в которой показано, что сигнальная пептидаза из Е. coli распознает и расщепляет сигнальную последовательность архей.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2017
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2017.-N 7.-С.1069-1074. Библ. 23 назв.
Просмотров: 31