ЭКСПРЕССИЯ, ОЧИСТКА И ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ ActhiS - ФЕРМЕНТА БИОСИНТЕЗА ТИАЗОЛА У Acremonium chrysogenum

Аннотация:

Тиаминпирофосфат является незаменимым для всех живых организмов коферментом. Его биосинтез включает независимые стадии синтеза предшественников: пиримидина и тиазола, которые затем сшиваются. В нашей предыдущей работе нами было показано существование корреляции повышенной экспрессии ActhiS и блокирования синтеза ActhiS с внутриклеточным содержанием тиамина у Acremonium chrysogenum. Однако до сих пор отсутствуют точные данные о структуре и функциях ActhiS. В настоящей работе с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) и ЯМР-спектроскопии охарактеризована связанная форма, состоящая из производного ADP - 5-(2-гидроксиэтил)-4-метилтиазол-2-карбоновой кислоты (ADT — 5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazole-2-carboxylic acid). Свободная от метаболита форма ActhiS, экспрессированная в клетках, культивируемых на минимальной среде М9, катализировала превращение NAD+ и глицина в ADT в присутствии ионов железа. Кроме того, показано, что остаток цистеина С217 является донором атома серы для образования тиазола. Наши данные подтверждают, что ActhiS является ферментом биосинтеза тиазола и одновременно источником атома серы у A. chrysogenum.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2017
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2017.-N 7.-С.1107-1117. Библ. 33 назв.
Просмотров: 18