Перенос in vivo гена бета-галактозидазы с помощью амфифильных и комбинированных липосом

Аннотация:

Цель исследования: Получение безопасного и эффективного вектора в целях генной терапии остается актуальной и нерешенной задачей, несмотря на усилия многих лабораторий в мире. Синтез веществ, имеющих сродство к ДНК и стабилизирующих ее спираль, а также обладающих группировками, опознаваемыми клетками нужных органов, является одним из перспективных направлений в таких исследованиях. Целью данной работы было изучение эффективности переноса в различные органы мышей репортерного гена бактериальной бета-галактозидазы липосомами, содержащими синтетические холестериновые производные олигоэтиленпропиленимина (дихоленим и трихоленим), а также лактозилированный диглицерид (лактозолипид, LacS). Предварительно электронномикроскопически была подтверждена способность холенимов образовывать комплексы с ДНК оптимальных для трансфекции размеров (100—200 нм). Проверка холенимов на токсичность in vivo и введение липосом (фосфатидилхолин (ФХ)/дихоленим, ФХ/трихоленим и ФХ/лактозолипид/дихоленим в комплексе с плазмидой pCMV-SPORT-бета-gal) в воротную вену печени проводились на самцах мышей линии ICR массой 30—40 г. Контролем служили интактные животные. В результате способность холенимов образовывать комплексы с ДНК была подтверждена электронными микрофотографиями. Размеры комплексов (100—200 нм) оказались оптимальными для трансфекции in vivo, а холенимы — нетоксичными. Через 2 сут. после введения комплексов гистохимически на криосрезах внутренних органов животных с X-Gal (субстрат) обнаружена отчетливо выраженная трансфекция органов, в том числе печени — главного объекта генной терапии. Лактозилированный липид LacS и производные олигоэтиленпропиленимина холенимы являются безопасными, не менее и эффективными для достижения экспрессии функционального гена in vivo, чем коммерческие препараты, и перспективными для эффективной адресной доставки генов.

Авторы:

Издание: Патологическая физиология и экспериментальная терапия
Год издания: 2017
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2017.-N 3.-С.4-9. Библ. 16 назв.
Просмотров: 28