ДИНАМИКА СВОЙСТВ ДВУХ ЛИНИЙ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ ВАРТОНОВА СТУДНЯ ПУПОЧНОГО КАНАТИКА ЧЕЛОВЕКА, ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ

Аннотация:

Проведен сравнительный анализ характеристик двух линий мезенхимных стволовых клеток (МСК) человека, полученных из Вартонова студня пупочного канатика (MSCWJ-1 и MSCWJ-2), на раннем (6-м) и поздних (13-м и 28-м) пассажах. Получены следующие результаты. При длительном культивировании изменяется морфология клеток у обеих линий, но в линии MSCWJ-2 клетки имеют более крупные размеры и большее количество дебриса по сравнению с MSCWJ-1. При длительном культивировании увеличивается среднее время удвоения клеточных популяций в обеих линиях, которое коррелирует с морфологическими изменениями клеток и постепенным увеличением активности бета-галактозидазы, свидетельствующей о наступлении репликативного старения. Межлинейные различия связаны с уровнем пролиферативной активности, динамикой индекса пролиферации (ИП), временем вхождения в активную фазу старения, соответствующем 30 удвоениям клеточной популяции в линии MSCWJ-2 и 60 удвоениям в MSCWJ-1. Линия MSCWJ-2 имеет более высокую долю стареющих клеток (80 %) по сравнению с MSCWJ-1 (58 %). Обе линии на ранних и поздних пассажах имеют нормальный кариотип 46, XX и 46, XY соответственно. Структурный кариотипический анализ выявил цитогенетическую гетерогенность, связанную в обеих линиях с появлением с низкой частотой случайных клональных и неклональных хромосомных нарушений, исчезающих в процессе длительного культивирования. В отличие от линии MSCWJ-1 в MSCWJ-2 на 6-м пассаже обнаружена I клональная перестройка короткого плеча 7-й хромосомы, встречающаяся с высокой частотой (39 %), но исчезающая на 13-м пассаже. В обеих линиях выявлены (на 6, 13 и 28-м пассажах) экспрессия поверхностных антигенов, характерных для МСК человека (CD44, CD73, CD90, CD105, HLA-ABC и виментина), и отсутствие экспрессии CD34 и HLA-DR. Снижается экспрессия поверхностного маркера недифференцированных эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) SSEA-4 и отсутствует экспрессия транскрипционного фактора SOX-2 в линии MSCWJ-2 на 13-м пассаже и в линии MSCWJ-1 на 28-м пассаже. На поздних пассажах по сравнению с 6-м нарушается адгезионная способность клеток. Но способность дифференцироваться в остеогенном и адипогенном направлениях подтверждена. В линии MSCWJ-2 в отличие от MSCWJ-1 на позднем пассаже отсутствует хондрогенная дифференцировка. Таким образом, в линии MSCWJ-2 обнаружены корреляции между часто встречающейся клональной хромосомной перестройкой на раннем пассаже и ранним репликативным старением с большой долей стареющих клеток, значительным снижением ИП при длительном культивировании, уменьшением уровня экспрессии маркеров недифференцированных ЭСК, снижением дифференцировочного потенциала. Учитывая наличие метаболической кооперации между клетками, можно с осторожностью предположить, что изменения в MSCWJ-2 связаны с запуском клеточных процессов, которые продолжаются уже в отсутствие часто встречающейся на раннем пассаже клональной хромосомной аберрации.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2017
Объем: 14с.
Дополнительная информация: 2017.-N 9.-С.574-587. Библ. 74 назв.
Просмотров: 34