ПОЛУЧЕНИЕ СЛИТЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ OprF-дельтаOprI, дельтаOprF-дельтаOprI И OprF-aTox-дельтаOprI PSEUDOMONAS AERUGINOSA

Аннотация:

Цель: Получение слитых рекомбинантных белков Pseudomonas aeruginosa, обладающих защитными свойствами от экспериментальной синегнойной инфекции. В плазмидах, предназначенных для экспрессии в клетках Escherichia coli, клонированы слитые последовательности генов oprF, oprl и делеционной формы toxA P. aeruginosa. Синтезированные рекомбинантные белки очищали в колонках с никель-сефарозой. При оценке защитных свойств препараты рекомбинантных белков вводили мышам внутрибрюшинно двукратно с двухнедельным интервалом. При экспериментальном заражении живую вирулентную культуру P. aeruginosa штамма РА103 инъецировали животным внутрибрюшинно через две недели после курса иммунизаций. В результате получены три слитых рекомбинантных белка: OprF-дельтаOprI включал полноразмерную последовательность белка OprF и делеционный вариант белка Oprl (с отсутствием первых 20 аминокислотных остатков); дельтаOprF-дельтаOprI состоял из С-концевой области (192 — 342 аминокислотные остатки) OprF и делеционного варианта белка Oprl; 3. OprF-aTox-дельтаOprI включал полноразмерную последовательность белка OprF, последовательность нетоксичного варианта экзотоксина А (без 106 С-концевых аминокислотных остатков) и делеционный вариант белка Oprl. Показано, что наилучшими защитными свойствами обладали слитые рекомбинантные белки OprF-дельтаOprI и OprF-aTox-дельтаOprI в иммунизирующих дозах 25 мкг и 50 мкг на животное соответственно для первого и второго белков. Полученные результаты открывают перспективы для дальнейших исследований по созданию специфических иммунобиологических препаратов на основе слитых рекомбинантных белков синегнойной палочки.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2017
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2017.-N 5.-С.32-38. Библ. 10 назв.
Просмотров: 28