СОЗДАНИЕ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ НА ОСНОВЕ КЛЕТОК HeLa, СТАБИЛЬНО ЭКСПРЕССИРУЮЩЕЙ МАРКЕР ЭКЗОСОМ CD63, СЛИТЫЙ С ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ БЕЛКОМ TagRFP И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ НТВН

Аннотация:

Экзосомы — микроскопические внеклеточные везикулы диаметром 30—100 нм, выделяемые в межклеточное пространство различными клетками млекопитающих. Эти везикулы обнаруживаются в большом количестве в сыворотке крови и других внеклеточных жидкостях организмов и содержат большой набор разнообразных белков, мРНК и микроРНК. Экзосомы участвуют в межклеточной коммуникации, секреции белков, иммунном ответе, а также вовлечены в развитие нейродегенеративных и онкологических заболеваний. Механизмы, с помощью которых они выходят или поступают в клетки, недостаточно изучены. В настоящей работе создана стабильная клеточная линия на основе клеток аденокарциномы шейки матки человека HeLa, экспрессирующая маркер экзосом, тетраспанин CD63, слитый с красным флуоресцентным белком TagRFP и последовательностью НТВН. Полученная линия клеток HeLa, экспрессирующая белок CD63-TagRFP-HTBH, позволит наблюдать за транспортом экзосом прижизненно. Ключевые слова: красный флуоресцентный белок tagRFP, экзосомы, тетраспанин CD63. Среди микровезикул, которые можно обнаружить в биологических жидкостях (плазме крови, межклеточной, плевральной и др.), выделяют экзосомы — небольшие нановезикулы размером 30—100 нм, формирующиеся из мультивезикулярных эндосом, и более крупные везикулы 100—1000 нм, отпочковывающиеся или снятые с поверхности мембран (shedding) везикулы. Несмотря на то что экзосомы были впервые описаны еще в 1983 г., только в последние годы было показано, что внеклеточные везикулы принимают участие в таких ключевых физиологических процессах, как межклеточные взаимодействия, клеточная адгезия, миграция, инвазия, ангиогенез и рост опухолевых клеток. Важно отметить, что эти везикулы представляют собой не просто «мешки для мусора», как считалось ранее, но играют значимую роль в клеточной коммуникации, механизмы которой, однако, мало изучены.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2017
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2017.-N 10.-С.662-668. Библ. 25 назв.
Просмотров: 34