ГЕТЕРОЛОГИЧНАЯ ЭКСПРЕССИЯ И ВЫДЕЛЕНИЕ БЕЛКА ЯДЕРНОГО ЭКСПОРТА NEP ВИРУСА ГРИППА А

Аннотация:

Белок ядерного экспорта NEP (NS2, 14,4 кДа) вируса гриппа А играет важную роль на различных этапах развития вирусной инфекции. Для проведения всесторонних исследований структуры и функции NEP необходимо располагать высокочистыми препаратами белка. В данной работе получена серия плазмидных конструкций с геном NEP иод контролем конститутивного промотора trp, позволяющих с высокой эффективностью экспрессировать белок NEP в клетках Escherichia coli. Разработан эффективный метод извлечения белка из телец включения на основе солюбилизации раствором додецилсульфата натрия. С использованием хроматографии на Ni-агарозе получены чистые препараты белка, несущие (Н1з)6-модули на N- или С-конце, с выходом более 20 мг на литр культуры. Методом КД продемонстрировано соответствие вторичной структуры полученных препаратов структуре природного белка NEP. Выявлена высокая склонность белка к агрегации в широком диапазоне условий.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2017
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2017.-N 12.-С.1907-1916. Библ. 32 назв.
Просмотров: 37