ЭКЗОЦИТОЗ МИЕЛОПЕРОКСИДАЗЫ ПРИ АКТИВАЦИИ НЕЙТРОФИЛОВ В ПРИСУТСТВИИ ГЕПАРИНА

Аннотация:

Проведено исследование экзоцитоза миелопероксидазы (МПО) из активированных нейтрофилов в присутствии анионного полисахарида гепарина. Определена оптимальная концентрация гепарина (0,1 ед/мл), при которой не происходит дополнительной активации клеток (отсутствие усиления экзоцитоза лизоцима, содержащегося в специфических и азурофильных гранулах). Установлено, что после предварительной инкубации клеток с гепарином (0,1 ед/мл) выход МПО из нейтрофилов, активированных различными стимуляторами (fMLP, РМА, растительными лектинами САВА и PHA-L), увеличивался по сравнению с экзоцитозом МПО при действии только активаторов. В экспериментах, проведенных с изолированной из лейкоцитов МПО, гепарин в диапазоне концентраций 0,1 -50 ед/мл не влиял на пероксидазную активность фермента. Таким образом, использование гепарина в концентрации 0,1 ед/мл позволяет избежать артефакта, обусловленного "потерей" МПО в результате её связывания с нейтрофилами, и повысить точность метода регистрации дегрануляции азурофильных гранул нейтрофилов, основанного на определении концентрации либо пероксидазной активности МПО в супернатантах клеток. Миелопероксидаза (МПО) — гемсодержащий фермент азурофильных гранул нейтрофилов, составляющий около 5% от общего белка этих клеток. При взаимодействии с пероксидом водорода МПО катализирует одноэлектронное окисление пероксидазных субстратов с образованием радикалов либо двухэлектронное окисление галогенидов и тиоцианата (псевдогалогенида) с образованием высокореакционных гипогалоидных кислот, которые и выполняют основную антимикробную функцию нейтрофилов. Образующиеся в результате функционирования МПО сильные окислители инициируют в очаге воспаления пероксидацию липидов, модификацию белков и нуклеиновых кислот (окисление, галогенирование, образование сшивок и пр.), тем самым способствуя развитию окислительного/галогенирующего стресса и воспаления. Кроме того, МПО усугубляет ряд патологических процессов, модулируя функции клеток независимо от своей ферментативной активности.

Авторы:

Издание: Биомедицинская химия
Год издания: 2018
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2018.-N 1.-С.16-21. Библ. 25 назв.
Просмотров: 58