ВЛИЯНИЕ ТОЧЕЧНОЙ МУТАЦИИ В КОНСТАНТНОМ ДОМЕНЕ БЕЛКА БЕНС-ДЖОНСА BIF НА ЕГО АГРЕГАЦИОННЫЕ СВОЙСТВА

Аннотация:

Миеломная нефропатия возникает за счет образования моноклональными легкими цепями иммуноглобулинов (белками Бенс-Джонса) различных агрегатов в почках больных множественной миеломой (ММ). Механизм образования амилоидных отложений до сих пор не выяснен. Ранее ключевую роль в формировании фибрилл отводили вариабельным доменам, которые благодаря соматическим мутациям проявляли амилоидогенные свойства. Однако был обнаружен белок Бенс-Джонса BIF, в котором образование фибрилл происходит за счет константного домена. Выявленная в аминокислотной последовательности константного домена BIF замена Serl77 на Asn, вероятнее всего, обусловлена наследственным фактором, а не соматической мутацией. Для исследования роли этой мутации в амилоидогенезе был выделен рекомбинантный белок Бенс-Джонса BIF и его аналог N177S, содержащий в 177 позиции Ser, что характерно для известных Km1, Km12 и Km3 аллотипов к-цепей иммуноглобулинов. Методом атомно-силовой микроскопии (АСМ) был проведен анализ морфологии агрегатов, образованных этими белками в условиях, отражающих условия во время транспортировки белка в кровотоке и его фильтрации в почечные клубочки, микроокружение в дистальных канальцах и условия в проксимальных почечных канальцах. Было показано, что характер агрегатов, образуемых белками B1F и N177S в течение 14 сут при 37°С, сильно отличался и зависел как от рН, так и от присутствия восстановителей дисульфидных связей. Для белка BIF образование фибрилл наблюдалось при рН 7,2, 6,5 и 10,1, вто время как для N177S фибриллы были обнаружены только в условиях щелочных рН (10,1). Рефолдинг обоих белков в присутствии 5 мМ дитиотреитола приводил к формированию разветвленных структур.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2018
Объем: 14с.
Дополнительная информация: 2018.-N 2.-С.166-179. Библ. 22 назв.
Просмотров: 33