ФЕРМЕНТАТИВНАЯ И БАКТЕРИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ МОНОМЕРНОЙ И ДИМЕРНОЙ ФОРМ МИЕЛОПЕРОКСИДАЗЫ

Аннотация:

Проведено сравнительное исследование ферментативной и бактерицидной активности зрелой, димерной миелопероксидазы (МПО) и её мономерной формы. Димерную МПО выделяли из клеток линии HL-60. В качестве мономерной формы использовали геми-МПО, которую получали из димерной МПО восстановлением дисульфидной связи, соединяющей протомеры в димер. Оценивали оба вида ферментативной активности, свойственных МПО (пероксидазную и галогенирующую), каждую из которых измеряли двумя методами. Бактерицидную активность системы МП0/Н202/СГ тестировали, используя лабораторный штамм Escherichia coli DH5a. Не было выявлено разницы в ферментативной и бактерицидной активности между димерной МПО и геми-МПО. Обе формы фермента не отличались между собой и по устойчивости к Н0С1 -основному продукту катализируемых МПО реакций. НОС1 вызывала дозо-зависимое уменьшение пероксидазной и хлорирующей активности, и это уменьшение происходило одинаковым образом в образцах димерной МПО и геми-МПО. При концентрации димерной МПО и геми-МПО, уравненной по гему, отмечен несколько больший бактерицидный эффект в случае системы геми-МП0/Н202/СГ по сравнению с системой димерная МПО/Н2О2/СГ. Это, скорее всего, обусловлено увеличением вероятности контакта фермента с поверхностью бактерий благодаря тому, что при равной концентрации по гему количество молекул геми-МПО в два раза больше количества молекул димерной МПО. Методом Вестерн-блоттинга с использованием антител против МПО впервые показано, что НОС1 вызывает расщепление димерной молекулы на мономерные субъединицы, по-видимому, в результате окисления дисульфидной связи между ними. Это позволяет предположить, что появление в крови МПО, соответствующей по массе мономеру, связано с повреждением димерной МПО активными формами галогенов, особенно при их избыточной продукции, создающей окислительный/галогенирующий стресс при воспалительных заболеваниях.

Авторы:

Издание: Биомедицинская химия
Год издания: 2018
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2018.-N 2.-С.175-182. Библ. 25 назв.
Просмотров: 35