Дальневосточный государственный медицинский университет Поиск | Личный кабинет | Авторизация
Поиск статьи по названию
Поиск книги по названию
Каталог рубрик
в коллекциюДобавить в коллекцию

ПОЛУЧЕНИЕ И СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИНИЙ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ КРАЙНЕЙ ПЛОТИ ДВУХ ДОНОРОВ ОДНОГО ВОЗРАСТА


Аннотация:

Получены две новые неиммортализованные линии из крайней плоти доноров одного возраста (2.5 года), названные FRSN-1 и FRSN-2. На 6-м пассаже проведен анализ ростовых характеристик и дифференцировочного потенциала этих линий и подтвержден для них статус мезенхимных стволовых клеток (МСК). Ряд характеристик анализировали в процессе длительного культивирования до 26-го пассажа. Время начала и динамика процесса репликативного старения, определенного по активности бета-галактозидазы, различается между линиями. Но к 26-му пассажу процесс репликативного старения одинаково усиливается в обеих линиях. Эффективность клонирования на 6-м пассаже различается между линиями: в FRSN-1 она значительно выше, чем в линии FRSN-2. На 26-м пассаже эффективность клонирования значительно снижается в FRSN-1, а в FRSN-2 клетки теряют эту способность. Кривые роста, полученные на 6-м пассаже, свидетельствуют об активной пролиферации обеих линий. Среднее время удвоения клеточных популяций у линий на 6-м пассаже не различается и составляет 36.9±0.2 и 39.0±0.8 ч соответственно. Пролиферативная активность в обеих линиях на 26-м пассаже снижается, среднее время удвоения клеточной популяции увеличивается, причем в клетках FRSN-2 оно значительно больше, чем в FRSN-1. Характер кривых роста линий существенно различается. Морфологический анализ показывает типичные для фазы старения изменения, связанные с увеличением размера и степенью распластанности клеток. Количественный и структурный кариотипический анализ, проведенный на 6-м пассаже, показал, что обе линии имеют нормальный кариотип человека (46, XY) и существенно не различаются по частоте хромосомных перестроек. Для определения статуса клеток анализ поверхностных маркеров на 6-м пассаже выявил в обеих линиях экспрессию поверхностных антигенов, характерных для МСК человека (CD44, CD73, CD90, CD105 и HLA ABC), и отсутствие экспрессии CD34, CD45 и HLA DR. В клетках обеих линий экспрессируются маркеры недифференцированных эмбриональных стволовых клеток человека (ЭСК) — SSEA-4 и SOX 2. Экспрессия SSEA-4 на 26-м пассаже не отличается от таковой 6-го пассажа. Обе линии экспрессируют маркеры ранней дифференцировки ЭСК в производные трех зародышевых листков. Клетки обеих линий на 6-м пассаже способны дифференцироваться в адипогенном, остеогенном и хондрогенном направлениях, что также подтверждает статус МСК. Адипогенный потенциал значительно снижается у обеих линий в течение 20 пассажей. Эти данные свидетельствуют о том, что уже при среднем уровне репликативного старения наблюдается изменение адипогенного дифференцировочного потенциала в отличие от неизменных ростовых характеристик. По-видимому, репликативное старение клеток вносит существенный вклад в изменение дифференцировочного потенциала МСК. В целом полученные результаты свидетельствуют о существовании ряда различий между линиями, полученными от разных доноров, по ростовым характеристикам и характеру репликативного старения. Эти различия могут быть обусловлены как непосредственным генетическим влиянием, так и опосредованно — разным микроокружением, которое детерминирует свойства клеток еще до выделения их из организмов доноров.

Авторы:

Крылова Т.А.
Мусорина А.С.
Кольцова А.М.
Зенин В.В.
Турилова В.И.
Яковлева Т.К.
Полянская Г.Г.

Издание: Цитология
Год издания: 2018
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2018.-N 4.-С.262-272. Библ. 0 назв.
Просмотров: 31

Рубрики
Ключевые слова
dr
hla
активность
активные
анализ
антиген
большая
бытовые
влияние
возраст
время
выделение
генетическ
года
данные
детерминированный
динамика
дифференцировки
дифференцировочные
длительная
донор
доноры
живые
зародышевой
изменение
исследования
кариотип
кариотипирование
клетка
клетки
клеток
клеточная
клеточные
клонирование
ключ
количественная
крайний
кривая
культивирование
линии
линия
листки
маркер
мезенхимная
микроокружение
морфологическая
направлениях
начала
недифференцированная
непосредственные
новые
нормальная
одного
определение
определенного
организм
остеогенная
отличия
отсутствие
пассаж
плоти
поверхностное
пола
получение
популяции
потенциал
проведения
производные
пролиферативная
пролиферация
процесс
различие
размер
разным
раннего
результата
роста
ростов
ряда
свидетельства
свойства
связанные
слова
состав
способности
способность
сравнительная
сравнительные
среднего
старение
статус
стволовая
стволовые
стволовых
степени
структурная
течения
типичный
увеличение
удвоение
уровни
фазы
характер
характеристика
характерного
хондро
хромосомный
целом
цитология
частота
человек
экспрессия
эмбриональное
эффективность
Ваш уровень доступа: Посетитель (IP-адрес: 3.147.57.197)
Яндекс.Метрика