Эффект взаимодействия гена индоламин-2,3-диоксигеназы и осложнений при беременности и родах на тяжесть эндогенных психозов

Аннотация:

На первом этапе кинуренинового пути триптофан превращается в кинуренин с помощью фермента индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO), а индуктором IDO являются провоспалительные цитокины. Учитывая значимость IDO в кинурениновом пути, мы попытались исследовать полиморфизмы в кодирующих их генах для поиска ассоциации этих полиморфизмов как с эндогенными психозами, так и с выраженностью основных клинических симптомов с учетом влияния средового фактора (осложнения при беременности и родах). Изучены полиморфизмы VNTR и rs9657182 в гене IDO. В исследование включено 251 больных с диагнозом шизофрения, шизоаффективный психоз, аффективные расстройства (рубрики F20, F25, F21, F31, F33, F34 по МКБ-10) и 214 человек без психических заболеваний. Был получен значимый эффект взаимодействия осложнений при беременности и родах с полиморфизмом IDO VNTR (р = 0.001) и IDO rs9657182 (р — 0.003) на выраженность симптомов по шкале PANSS. Таким образом, выявленные эффекты позволяют предположить, что полиморфизм IDO модифицирует влияние пред- и родовых осложнений на симптоматику эндогенных психозов. Ключевые слова: шизофрения, кинуренин, провоспалительные цитокины, средовый фактор. Введение: В последнее время наблюдается возрастание интереса к изучению гена, кодирующего фермент индоламин-2,3-диоксигеназу (IDO) и его роли в воспалительных процессах, имеющих место при шизофрении. Показана ключевая роль IDO в запуске кинуренинового пути катаболизма триптофана и формировании продуктов его распада в виде кинуреновой, хинолиновой, пиколиновой и 3-гидроксиан-траниловой кислот. Этот интерес вызван тем, что продукты метаболизма триптофана оказывают влияние на функционирование глутаматергических нейронов. Так, кинурениновая кислота является антагонистом рецепторов глутамата типа NMDA. Этот метаболит блокирует рецепторы, что ведет к снижению активности глутаматергической системы, что, в свою очередь, может быть причиной возникновения шизофрении. Выбор пути, по которому пойдет метаболизм триптофана, определяется многими факторами. В качестве одного из них выступает наличие легкого воспалительного процесса, который, судя по имеющимся данным, развивается при шизофрении. Такое предположение обосновано тем, что на первом этапе кинуренинового пути триптофан превращается в кинуренин с помощью IDO, а индуктором IDO являются провоспалительные цитокины. Цель настоящего исследования состояла в обнаружении ассоциации полиморфизмов, один из которых обусловлен вариабельностью числа повторяющихся последовательностей (VNTR), а другой — однонуклеотидной заменой (rs9657182), с клиническими проявлениями шизофрении, в частности с выраженностью основных симптомов, и установлении модулирующей роли средовыми факторами (осложнения при беременности и родах). Также предполагалось изучить распределение генотипов IDO в полиморфных локусах, в группах больных эндогенными психозами и психически здоровых людей. Пациенты и методы исследования В исследовании приняли участие больные эндогенными психозами и контрольная группа психически здоровых испытуемых. Выборка больных состояла из 257 человек (15 женщин и 244 мужчины, средний возраст 25,6±6,3 лет, возраст к началу заболевания 25,8+10,0 лет), с диагнозом шизофрения, шизоаффективный психоз, аффективные расстройства (рубрики F20.,F25.,F21.,F31.,F33.,F34 по МКБ-10). Группа психически здоровых людей включала в себя 214 человек (24 женщины и 190 мужчин, средний возраст 31,3+11,6 лет). Все участники дали информированное согласие на исследование. Для количественной оценки выраженности клинических симптомов заболевания использовалась международная шкала PANSS (The Positive and Negative Syndrome Scale). Оценка осложнений при беременности и родах проводилась с использованием данных из истории болезни или опроса родственников с занесением в карту средовых факторов. Молекулярно-генетическое исследование включало в себя выделение ДНК из венозной крови больных и проведение генотипирования с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим разделением полученных фрагментов с помощью электрофореза. ДНК из венозной крови выделяли стандартным фенол-хлороформным методом. Для определения полиморфизма IDO VNTR использовали олигонуклеотидные праймеры: прямой — 5'ААТ ССТ GGG АСА GAA ТСА ТС и обратный -5' ATG AGG СТА ATA СТТ TGG G. Реакционная смесь объемом 15 мкл содержала 2.5 мМ хлорида магния, 0.2 мМ каждого dNTP, 0.5 ед. полимеразы Taq, 100 нг геномной ДНК, 10 пкмол каждого из праймеров, 10х буфер для Taq-полимерэзы (Helicon) и 0.8М бетаина. Денатурацию проводили в течение 4 мин при 94оС, далее следовали 30 циклов амплификации (94оС — 30 с; 53оС — 30 с; 72°С — 30 с). На заключительной стадии образцы прогревали при 72°С 2 мин.. Разделение полученных фрагментов осуществляли в 8%-ном полиакриламид-ном геле в течение 1 часа при 240V. Размеры фрагментов составляли: 208 п.о. (аллель VI) и 232 п.о. (аллель V2). Для полиморфизма IDO rs9657182 использовали олигонуклеотидные праймеры: прямой — 5'- TGC ТСС AAA ATT ATA TGA GAT ТСС и обратный -5' GAC АСА АСА СТТ TAG GAT 11 G СА. Состав реакционной смеси был тот же, что и для полиморфизма IDO VNTR. Денатурацию проводили в течение 4 мин при 94°С, далее — 30 циклов амплификации (94°С — 30 с; 61°С — 30 с; 72°С — 30 с). На заключительной стадии образцы прогревали при 72°С 2 мин. Рестрикцию проводили ферментом Bspl9I (Сибэнзим, Россия) в условиях, рекомендованных производителем. Разделение фрагментов осуществляли в 8%-ном полиакриламидном геле в течение 1 часа при 240V. После рестрикции получали фрагмент длиной 232 п.о. (генотип СС) и фрагменты 90 и 142 п.о., которые соответствовали генотипу ТТ. На наличие гетерозиготного генотипа ТС указывало наличие трёх фрагментов величиной 232, 90 и 142 п.о. Статистическая обработка результатов проводилась в программе Statistica 6.0 с использованием критерия Хи2 Пирсона для качественных признаков. Для оценки ассоциации генетического варианта с количественными признаками использовали факториальный анализ (ANOVA). Результаты Распределение генотипов по полиморфизмам IDO VNTR и rs9657182 в группе больных шизофренией и психически здоровых людей не отклонялось от равновесия Харди-Вайнберга (р > 0.05). Генотипы IDO VNTR в группе больных были распределены следующим образом: V1V1 — 26,85% (п = 96); V1V2 — 50,19% (п = 129); V2V2 — 22,69% (п = 59), и IDO rs9657182: ТТ- 24,05% (п = 57); СТ — 50,21% (п = 119); СС — 25,74% (п = 61), а в контрольной группе их частота составляла, соответственно: V1V1 — 24,77% (п = 53); V1V2 — 44,86% (п = 96); V2V2 — 30,37% (п = 65), и IDO rs9657182: ТТ — 31,92% (п = 68); СТ — 46,01% (п = 98); СС — 22,07% (п = 47). Значимых различий между группами обнаружено не было (Chi2 = 1,19; df = 2; р = 0.5). Выявлен значимый эффект взаимодействия осложнения при беременности и родах с полиморфизмом IDO на выраженность симптомов по шкалам PANSS, IDO VNTR (F = 2,5; df (6;216); р = 0.001), IDO rs9657182 (F = 2,2; df (6;213); р = 0.003). Дальнейший анализ показал, что эффект взаимодействия был значим для субшкал негативных симптомов (IDO VNTR) (р = 0.005) и общих психопатологических симптомов (р = 0.001). У больных с генотипом V1V2 отмечена большая выраженность негативных и общих позитивных симптомов в случае наличия родовых осложнений по сравнению с их отсутствием. Также был значим эффект взаимодействия между полиморфизм IDO rs9657182 и родовыми осложнениями на субшкалу негативных симптомов (р=0.007). У больных с генотипом ТС отмечена большая выраженность негативных симптомов при наличии родовых осложнений. При сравнении факторов влияния на симптомы значимых различий найдено не было. Из этого можно предположить, что эффект генотипа на выраженность симптомов гораздо слабее по сравнению с изученным средовым фактором. Заключение Таким образом, выявленные эффекты позволяют предположить, что полиморфизм IDO модифицирует влияние родовых осложнений на симптоматику шизофрении. Известно, что IDO — фермент, инициирующий окислительную деградацию L-триптофана по кинурениновому пути. Клетки, экспрессирующие IDO, а также метаболиты триптофана вовлечены в индукцию иммунной толерантности при различных физиологических и патологических условиях, включая инфекционные заболевания, нейропатологию, беременность, воспалительные и аутоиммунные нарушения. Эти результаты вполне согласуются с высказанным предположением, которое опиралось на кинуренин-кинуреновую гипотезу происхождения шизофрении и роли IDO в кинурениновом пути метаболизма триптофана. В нашем исследовании был впервые найден модифицирующий эффект полиморфизма гена IDO на связь осложнений при беременности и родах с выраженностью негативных и общих психопатологических симптомов, оцениваемых с помощью шкалы PANSS. Однако, полученные нами результаты следует рассматривать как предварительные.

Авторы:

Издание: Психическое здоровье
Год издания: 2018
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 2018.-N 4.-С.43-45. Библ. 6 назв.
Просмотров: 46